科研药盒,慎用于临床
色氨酸试剂盒说明书 Trp(HY-60108) KIT
色氨酸(Tryptophan,Trp)是一种芳香族氨基酸,为人体必需氨基酸之一,正常成人每日需要量约3mg/kg体重。人体摄入的Trp参与体内蛋白质合成和代谢的网路调节,其来源主要靠食物供给,在肝、肾、脑等组织器官中进行代谢生成具有生理作用的生物活性分子。Trp降解主要经两个途径:合成血清素途径和犬尿氨酸途径。rrp代谢生成的中间产物和终产物,有许多是具有特殊生理作用的生物活性分子。其中,5.羟色胺途径的代谢产物.5-HT,在中枢神经系统是一种神经递质,广泛参与精神情绪活动、睡眠与觉醒、体温、血压及内分泌的调节等多种生理活动酪氨酸(Tyrosine,Tyr)也是人体不可缺少的氨基酸,属于非必需氨基酸,人体所需的酪氨酸系由饮食或通过氧化苯丙氨酸获得,除供给合成蛋白质之用外,它还是多巴胺、肾上腺素、甲状腺素和黑色素等物质的前体。用。研究发现,许多疾病都与Tyr和Trp代谢失调有关,Tyr和Trp的含量变化与神经精神疾病、免疫系统疾病、肿瘤、肝脏疾病等密切相关。因此,定量分析血清Tyr和Trp浓度不仅在蛋白质的生物合成及食物营养价值方面具有重要意义,而且可为临床和科研对于相关疾病的诊断治疗和病理机制的研究提供重要依据。血液及固体蛋白质经碱水解后,降解成多肽和游离的氨基酸,在酸性介质中,氧化剂存在下,色氨酸吲哚环与对二甲氨基苯甲醛反应生成蓝色化合物,在一定范围内颜色深浅与色氨酸含量成正比。
标本处理:1血清标本,取血清标本200微升,加200微升去蛋白沉淀剂,混均,室温10分钟,3500转/分,离心15分钟,取上清检测。 2固体:0.1mg样本置于50mL容量瓶中,在轻轻振摇中缓慢加入25mL氢氧化钾溶使试样湿润且不粘壁,置于40±1℃培养箱中水解16~18h。 取出水解液冷却至室温后,用水定容,摇匀,取部分水解液以3500r/min转速离心15min。取上清检测。 药盒组成: 试剂1,蛋白沉淀剂 试剂1,蛋白沉淀剂 试剂2:硫酸溶液 试剂3:氢氧化钾溶液 试剂4:显色剂 试剂5:亚硝酸钠溶液 试剂6:色氨酸标准品489、244.5、122.25、61.125、30.26、15.28umol/L试剂1试剂1
操作步骤:
色氨酸检测操作步骤 (单位ul) —————————————————————————————————————
标准管 对照管 标本管 —————————————————————————————————————— 标准 100 ------ ------ 水 ----- 100 ------ 标本 ----- ------ 100 试剂3 100 100 100 —————————————————————————————————————— 4°C 10分钟 ——————————————————————————————————————— 试剂4 500 500 500 ——————————————————————————————————————— 混均,室温40分钟。 ——————————————————————————————————————— 试剂5 200 200 200 ——————————————————————————————————————— 混均,室温30分钟 ,空白管调零,595比色,记吸光度或酶标仪比色。
计算结果 适用于分光光度计:将标准品用缓冲液进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。 全自动或半自动生化仪直接读取数据, 正常参考值: 各实验室应建立自己的正常值 正常参考值仅供参考: 28.52~72.28umol/L 注意事项: 1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。 2. 本法以定值血清为标准,准确性高。 3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。 4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。 本试剂盒主要技术指标: 1、线性范围:0-80umol/L 2、精密度:批内变异系数:CVw<8.3%; 批间变异系数:CVw < 9% 3、灵敏度:<1 umol/L
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