载脂蛋白-E放免试剂盒说明书

                                         ApoE（HY-100223） RIA  KIT 
       载脂蛋白E(apolipoprotein E，ApoE)是一种富含精氨酸的碱性蛋白，人ApoE由299个氨基酸残基组成，分子量为34145D，含32个Arg和12个Lys存在于血浆的CM、VLDL及其残粒和β-VLDL中均含有ApoE，一部分ApoE在血液中与ApoAⅡ形成复合体。载脂蛋白E是LDL受体的配体，也是肝细胞CM残粒受体的配体，它与脂蛋白代谢有密切相关性,ApoE具有多态性，多态性是决定个体血脂水平与动脉粥样硬化发生发展密切相关;ApoE参与激活水解脂肪的酶类，参与免疫调节及神经组织的再生。人类ApoE主要在肝脏和脑组织合成，在其他组织包括单核细胞（含巨噬细胞）也有合成能力。人的肾上腺、卵巢颗粒细胞也能合成ApoE。脑中ApoE的mRNA表达总量是肝脏的1/3，星形细胞是其主要合成部位。脑中生成的ApoE的作用可能是使细胞内的脂类重新分配而保持脑环境中的胆固醇平衡。脑肿瘤中发现有高浓度的ApoE，可作为神经胶质细胞瘤的标记。 

药盒主要应用范围：
     *  眼病研究
     *  动脉粥样硬化研究；
     *  老年痴呆的研究；
     
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． ApoE缓冲液1瓶
2． ApoE（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． ApoE标准品8瓶，浓度为10、20、40、80、160、320mg/L
4． ApoE抗体 1瓶。
5． 125I –ApoE 1瓶   
标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
 
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
                       ApoE  RIA加液程序    （单位： ul ）
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              试   剂      T       NSB      S0    S1~S6      样  品
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              缓 冲 液    ——    200     100     ——       ——
              标 准 品    ——    ——     ——     100       ——
              样    品     ——    ——     ——     ——       100
              抗    体      ——    ——    100     100       100
          ¹²⁵I- ApoE   100     100     100     100       100
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                             摇匀4℃ 放置24小时
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              分 离 剂    ——   500      500     500       500
   
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上

绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及

样品浓度。
注意事项：  
      本月标准品每瓶用           ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用        ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用        ml缓冲液溶解
      本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<1 mg/L
3、 标准曲线范围：10-320mg/L
4、 批内变异系数：CVw<7.6%；
      批间变异系数：CVw < 9.5% 。
5、 正常参考值：30-50mg/L各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                
     本月药盒参考数据：
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        T  NSB       S0     S1    S2    S3     S4      S5    S6   
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    CPM
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             N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
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