科研药盒,慎用于临床
丙酮酸激酶试剂盒说明书 PK(HY-60085)KIT 丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP变为ATP和丙酮酸,是糖酵解过程中的主要限速酶之一,有M型和L型两种同工酶,M型又有M1及M2亚型。M1分布于心肌、骨骼肌和脑组织;M2分布于脑及肝脏等组织。L型同工酶主要存在于肝、肾及红细胞内。PK的测定可用于诊断心肌梗死,肌原性疾病,血液系统疾病等疾病。
检测原理:在Mg2+、K+存在时,PK催化磷酸烯醇式丙酮酸上的磷酸基转移给ADP,生成丙酮酸和ATP,丙酮酸与2.4-DNPH反应生成苯腙,在碱性条件下呈棕红色。
试剂盒组成: 试剂1:缓冲液,1瓶 试剂2:基质液:1瓶 试剂3:反应停止液:1瓶 试剂4:显色液:1瓶 试剂5:丙酮酸标准液,浓度分别为4mmol/L,2mmol/L,1mmol/L,0.5mmol/L,0.25mmol/L 操作步骤:
丙酮酸激酶检测操作步骤 (单位ul) —————————————————————————————————————
S1-S5标准管 对照管 标本管 —————————————————————————————————————— 标准 50 ------ ------ 水 ----- 50 ------ 样本 ---- ---- 50 试剂2 200 200 200 —————————————————————————————————————— 37度温浴 10分钟 —————————————————————————————————————— 试剂3 250 250 250 —————————————————————————————————————— 37度温浴 10分钟 —————————————————————————————————————— 试剂4 1000 1000 1000 —————————————————————————————————————— 混匀,5分钟后 510nm波长 比色, 记吸光度或酶标仪比色。
结果计算:
如果没有全自动生化仪或半自动生化仪,将标准品用缓冲液进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。 (适用于分光光度计) 全自动或半自动生化仪直接读取数据
正常参考值: 各实验室应建立自己的正常值,正常参考值仅供参考:28.3±12.8U/L
注意事项: 1. 本法在室温(22-25℃)内完成。 2. 本产品仅用于体外诊断,避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。 3. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术参数
灵敏度:<2U/L 线性范围:0-40U/L 本实验回收系数:94.1%~99.02% 变异系数: 0.64%~2.47%
生产日期: 有效日期: 生产批号:
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