科研药盒,慎用于临床 促甲状腺受体放免试剂盒说明书
(TSHR HY-100238) 促甲状腺激素受体(thyrotmpin receptor,TSHR)是一种膜受体,它位于染色体14q32,长约60 kb,有10个外显子和9个内含子,存在于甲状腺滤泡细胞(TEC)胞膜上,其活性片段主要集中在膜外区。TSHR蛋白共由764个氨基酸残基组成,分为膜外区、跨膜区和膜内区3个部分。第1-9号外显子编码TSHR蛋白氮端的膜外区,第10号外显子编码跨膜区和膜内区。其中,膜外区有418个氨基酸残基,呈亲水性,是与促甲状腺激素(thyroid.stimulating hormone,TSH)结合的重要部位;跨膜区有264个氨基酸残基,呈疏水性,有7个跨膜段,TSHR蛋白的跨膜区对信息传递、维持TSHR蛋白的三维结构及其生物活性均有影响;而膜内区则与G蛋白耦联来启动信号传导。TSHR与很多自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thymid disease,AITD)有密切关系。促甲状腺素受体(TSHR)在生理情况下,它与促甲状腺素(TSH)结合,调节TEC的生长、分化和功能。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的TSHR和加入的125I –TSHR(标记的TSHR抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –TSHR(标记的TSHR抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的TSHR的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中TSHR的含量。 该药盒主要应用范围: •甲状腺类疾病的诊断 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1. TSHR 缓冲液1瓶 2. TSHR(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3.TSHR标准品6瓶,浓度为0.312、0.625、1.25、2.5、5、10 pg/ml 3. TSHR抗体 1瓶。 4. 125I –TSHR 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: TSHR RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I-TSHR 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<7.3 %。 2、 灵敏度:<0.01 pg/ml 3、 标准曲线范围:0.325-10 pg/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.9%; 批间变异系数:CVw <8.1% 。 5、 正常参考值:1.3pg/ml±0.68pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————————————————
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