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                                                                                                       科研药盒,慎用于临床

                             葡萄糖-6-磷酸脱氢酶试剂盒说明书
                                                  G-6-PD(HY-60123)KIT
       6一磷酸葡萄糖脱氢酶(glucose一6一phosphate dehydrogenase,G6PD)是磷酸戊糖途径的限速酶,控制着还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinomide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)的生成。G6PD可通过NADPH和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)在细胞内发挥抗氧化作用。

检测原理:红细胞戊糖代谢旁路中,G6PD及6PGD两步酶促反应都可以产生NADPH,如果在反应系统中同时添加底物葡萄糖-6-磷酸和葡萄糖酸-6-磷酸,测得的活性是G6PD与6PGD之和。
6PDA+NADP→6-PGD核酮糖-5-磷酸+NADPH
G6P+NADP→G6PD6-磷酸葡萄糖酸+NADPH
NADPH的H传递给氧化型NBT(黄色)变为还原型NBT(蓝色),蓝色的深浅程度与NADPH的量成正比。以G6P为底物的反应测定的NADPH中,有一部分NADPH是6PGD催化产生的。

试剂盒组成
试剂1 :底物:1瓶 Tris—HCl(pH8.0), 6 mmoL/L 6一磷酸葡萄糖, 6 mmoL/L 6一磷酸葡萄糖酸
试剂2 : 2 mmol/L NADPH  O.1mol/L MgCL2
试剂3 :含NBT的缓冲液 

操作步骤:
                     G-6-PD、6-PGD操作步骤                        (单位ul)
—————————————————————————————————————
                     对照管          标准管          样本
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样本                  ——            ——            200
水                    200             ——            ——
试剂1                 50               50             50       
试剂2                 50               50             50
——————————————————————————————————————
                         混匀,37℃水浴 ,20分钟
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试剂3                2000             2000           2000
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650nm 处直接在分光光度计,半自动或全自动生化仪上直接读取OD值或数据

计算结果
以各标准管的单位浓度为横坐标,以各管透光度差值为纵坐标作图。(适用于分光光度计)
全自动或半自动生化仪直接读取数据为G-6-PD+6-PGD的活性。6-PGD=结果—G-6-PD
正常叁考值:
各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考:
其正常值为:G6PD/6PGD大于1

注意事项:
1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
2. 本法以定值血清为标准,准确性高。
3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮   肤和眼睛,切勿吞咽。
4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。

本试剂盒主要技术指标
1、 线性范围:0-15U/L
2、 精密度:批内变异系数:CVw<7.3%;
      批间变异系数:CVw < 10% 。
3、 灵敏度:<0.02U/L

生产日期:

有效日期:

生产批号:

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