本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 雷帕霉素靶蛋白放免试剂盒说明书 mTOR(HY-I0029) RIA KIT 雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种非典型高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其特异性抑制剂为雷帕霉素,当雷帕霉素与之结合后可抑制其激酶活性。mTOR对生长因子、营养物质、机体能量状态等刺激产生应答,调节细胞生长、增殖、代谢、调控细胞周期等,因此与许多疾病相关,例如心血管疾病、炎症、肿瘤、代谢性疾病和神经性疾病等。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的MTOR和加入的125I –MTOR(标记的MTOR抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –MTOR(标记的MTOR抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的MTOR的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中MTOR的含量。 该药盒主要应用范围: 心血管疾病 代谢性疾病 肿瘤疾病 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1. MTOR 缓冲液1瓶 2. MTOR(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3. MTOR标准品6瓶,浓度为3.12、6.25、12.5、25、50、100pg/ml 4. MTOR抗体 1瓶。 5. 125I –MTOR 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: MTOR RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I-MTOR 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<6.8%。 2、 灵敏度:<0.3pg/ml 3、 标准曲线范围:3.125-100pg/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw <8.1% 。 5、 正常参考值:16pg/ml±6.1pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————————————————
生产日期: 有效日期: 生产批号: 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编:100085 电话:010-88114651 010-56146198 传真:010-88112680 免费电话:8008109828
|