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                                                                                                               科研药盒,慎用于临床
                   总谷胱甘肽试剂盒说明书
                             GSH(HY-60008)KIT
      谷胱甘肽(glutathioneGSH)是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸结合,含有巯基的的三肽,具有抗氧化作用和整合解毒作用。半胱氨酸上的巯基为谷胱甘肽活性基团(故谷胱甘肽常简写为G-SH),易与某些药物(如扑热息痛)、毒素(如自由基、碘乙酸、芥子气,铅、汞、砷等重金属)等结合,而具有整合解毒作用。故谷胱甘肽(尤其是肝细胞内的谷胱甘肽)能参与生物转化作用,从而把机体内有害的毒物转化为无害的物质,排泄出体外。谷胱甘肽还能帮助保持正常的免疫系统的功能。
检测原理:
试剂盒中含有DTNB:5,5’–二硫代–双–(2–硝基苯甲酸),能和谷胱甘肽(GSH)反应产生2–硝基–5–巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物(GSSG),由于2–硝基–5–巯基苯甲酸是一黄色产物,通过测定其在412 nm处的最大吸收可确定样品中谷胱甘肽的含量。GSSG在谷胱甘肽还原酶作用下生成GSH,GSH又和DTNB作用生成2–硝基–5–硫基苯甲酸,利用这一循环反应可提高总谷胱甘肽测定的灵敏度。
试剂盒组成:
试剂1(R1):去蛋白试剂  1瓶
试剂2(R2):液体 1瓶(含谷胱甘肽还原酶)
试剂3(R3):液体 1瓶(含 DTNB)
试剂4(R4):液体 1瓶 (含NADPH)
标准瓶:1瓶
操作步骤:
有半自动和全自动生化仪的直接定标,空白调零,在机器上直接读取结果。
有分光光度计的,将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后在分光光度计上读取OD值,将未知标本的OD值在曲线上查出对应的浓度值。
                  总GSH操作步骤      单位(ul)
样品   血清 50微升  组织液100或200微升  正常值、质控:50微升
—————————————————————————————————————
                         对照管          标准管          样本
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样本                    ——             ——            50
蒸馏水                 50                ——            ——
标准品                ——              50              ——
试剂1                  50               50               50
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                      室温 5min  3500转/分  离心 10min
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试剂2:                100              100             100
试剂3:              100              100             100
——————————————————————————————————————
                                   室温 5min

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试剂4:               100              100              100
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动力学法   延迟时间  20秒  测量时间 20秒  412nm  定标3.34,直接半自动或全自动生化仪上读取结果;或者将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后在分光光度计上读取OD值,将未知标本的OD值在曲线上查出对应的浓度值。全自动或半自动生化仪直接读取数据。
计算结果
适用于分光光度计:将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。()
全自动或半自动生化仪直接读取数据,
            
正常参考值:
各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考: 10-15umol/L
注意事项:
1. 全血标本不能有凝块。
2.每次测定对照管吸光度应比较恒定,若吸光度降低应重新配制乙酰胆碱标准液。
3.碱性羟胺加入后,须待1min以上再加酸,以保证其与乙酰胆碱充分作用。
4.此法显色不稳定,特别是室温超过20℃时影响明显。因此,室温较高时,最好于冰水浴操作,并在5~10min内比色完毕。
样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
5.本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术指标:
1、线性范围:0-20umol/L
2、精密度:批内变异系数:CVw<7.3%;
      批间变异系数:CVw < 10%
3、灵敏度:<0.1  umol/L

生产日期:
有效日期:
生产批号:

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