科研药盒,慎用于临床 磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶试剂盒说明书 PCK1(HY-50110) KIT 磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶(英语:Phosphoenolpyruvate carboxykinase,或称为烯醇丙氨酸磷酸羧激酶或磷酸烯醇丙酮酸羧激酶,简称为PCK)是以一条单一肽链构成,相对分子质量为740千道尔顿的一种激酶。在磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶的催化下,草酰乙酸被转变为磷酸烯醇式丙酮酸和二氧化碳。该反应消耗一分子的鸟苷三磷酸以提供磷酰基。在糖异生作用中,此酶与丙酮酸羧化酶一起构成了从丙酮酸转化为磷酸烯醇丙酮酸的迂回步骤。 一、 检测原理 Enolase PGA -------------- PEP+H2O Mg++
PK PEP+ADP----------- PY+ATP LDH PY+NADH+H+----------- Lac+NAD+ 在反应过程中,检测波长吸光度的下降速率,可计算酶的活力单位
二、药盒组成: 试剂一 基质缓冲液 1瓶 (含TEA、KCL、ADP、β-NADH、PK、LDH) 试剂二: 液体,1瓶 (PGA溶液) 标准品:2瓶,共2ml 标准浓度为50U/ml
三、操作方法: 标本留取:组织匀浆后,离心后取上清液进行检测,如果是血样直接进行检测 PCK 操作程序(单位:ul) ———————————————————————————— 试 剂 标准品 样本 蒸馏水 ———————————————————————————— 标准品 100 —— —— 蒸馏水 —— —— 50 样本 —— 50 —— 试剂一 1000 1000 1000 ———————————————————————————— 混匀,37℃孵育5分钟 ———————————————————————————— 试剂二 50 50 50 ———————————————————————————— 混匀,选定340nm光波, 以蒸馏水管作为空白管调零 分别读取空白管和测定管吸光值。每30s记录一次,连续记录3min,用空白管的吸光值减去测定管。 四、技术特性: 精密度:批内CVw<6%,批间CVb<11% 五、注意事项: 试剂盒保存温度为4-8℃,保存1个月 生产日期: 有效日期 生产批号: 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编:100085 电话:010-88114651 010-56146198 传真:010-88112680 免费电话:8008109828
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