科研药盒 慎用于临床 细胞色素C氧化酶I说明书 CytochromeC(HY-60117)KIT 细胞色素c氧化酶(英语:Cytochrome c oxidase)是一种氧化还原酶,通用名为“细胞色素-c氧化酶”,系统名称为“亚铁细胞色素-c:氧气氧化还原酶”(EC 1.9.3.1)。存在于真核生物细胞的线粒体上,主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量,是线粒体电子传递链末端氧化酶,其活力与机体代谢异常、疾病及中毒关系密切。 细胞色素C分子中含赖氨酸较高,所以等电点偏碱,为pH 10.8,分子量为12000~13000道尔顿。它易溶于水及酸性溶液,且较稳定,不易变性,组织破碎后,用酸性水溶液即能从细胞中浸提出来。细胞色素C分为氧化型和还原型两种,因为还原型较稳定并易于保存,一般都将细胞色素C制成还原型的,氧化型细胞色素C在408nm、530nm有最大吸收峰,还原型细胞色素C的最大吸收峰为415nm、520nm和550nm,这一特性可用于细胞色素C的含量测定。 测定原理 采用分光光度法,在0 l mol/L磷酸缓冲渡(pH6.0)的反应介质内测定COX氧化还原态细胞色素C在550 nm处测光密度值的变化,并据此计算出COX的活性 试剂组成 试剂一: 细胞色素C 50mlⅹ1瓶 试剂二: PBS缓冲液 40mlⅹ1瓶 试剂三: 饱和高铁氰化钾 1mlⅹ1瓶 操作步骤 细胞色素c氧化酶操作步骤 单位(ul) —————————————————————————————————————— 空白管 标准管 样本管 —————————————————————————————————————— 蒸馏水 50 —— —— 标准液 —— 50 —— 样本 —— —— 50 试剂一 500 500 500 试剂二 400 400 400 试剂三 10 10 10 —————————————————————————————————————— 用分光光度计在550nm波长下测得A.随后每隔1分钟测定一次A值持续测定5分钟;使之完全氧化并记录结果
结果计算 适用于分光光度计:将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。 全自动或半自动生化仪直接读取数据
正常参考值: 各实验室应建立自己的正常值 正常参考值仅供参考:1.404±0.353 u∕L(胎盘组织)))
注意事项: 1. 本法以定值血清为标准,准确性高。 2. 本产品仅用于体外诊断,避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。 3. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒技术参数 灵敏度:0.1U/L 线性范围:0-2U/L 本实验回收系数:98.9%~99.55% 变异系数: 0.86%~2.96%
引用文献:细胞色素C氧化酶活力测定方法概况(毒理学杂志2010 年10 月第24 卷第5 期)
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