本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 6一磷酸葡萄糖脱氢酶
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶试剂盒操作说明书 6-PGD 、G-6-PD(HY-60124) 6一磷酸葡萄糖脱氢酶(glucose一6一phosphate dehydrogenase,G6PD)是磷酸戊糖途径的限速酶,控制着还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinomide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)的生成。G6PD可通过NADPH和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)在细胞内发挥抗氧化作用。
检测原理:红细胞戊糖代谢旁路中,G6PD及6PGD两步酶促反应都可以产生NADPH,如果在反应系统中同时添加底物葡萄糖-6-磷酸和葡萄糖酸-6-磷酸,测得的活性是G6PD与6PGD之和。 6PDA+NADP→6-PGD核酮糖-5-磷酸+NADPH G6P+NADP→G6PD6-磷酸葡萄糖酸+NADPH NADPH的H传递给氧化型NBT(黄色)变为还原型NBT(蓝色),蓝色的深浅程度与NADPH的量成正比。以G6P为底物的反应测定的NADPH中,有一部分NADPH是6PGD催化产生的。
试剂盒组成: 试剂1 :底物:1瓶 Tris—HCl(pH8.0), 6 mmoL/L 6一磷酸葡萄糖, 6 mmoL/L 6一磷酸葡萄糖酸 试剂2 : 2 mmol/L NADPH O.1mol/L MgCL2 试剂3 :含NBT的缓冲液
操作步骤: G-6-PD、6-PGD操作步骤 (单位ul) ————————————————————————————————————— 对照管 标准管 样本 —————————————————————————————————————— 样本 —— —— 200 水 200 —— —— 试剂1 50 50 50 试剂2 50 50 50 —————————————————————————————————————— 混匀,37℃水浴 ,20分钟 —————————————————————————————————————— 试剂3 2000 2000 2000 —————————————————————————————————————— 650nm 处直接在分光光度计,半自动或全自动生化仪上直接读取OD值或数据
计算结果 以各标准管的单位浓度为横坐标,以各管透光度差值为纵坐标作图。(适用于分光光度计) 全自动或半自动生化仪直接读取数据为G-6-PD+6-PGD的活性。6-PGD=结果—G-6-PD 正常叁考值: 各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考: 其正常值为:G6PD/6PGD大于1
注意事项: 1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。 2. 本法以定值血清为标准,准确性高。 3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。 4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术指标: 1、 线性范围:0-15U/L 2、 精密度:批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 3、 灵敏度:<0.02U/L
生产日期: 有效日期: 生产批号: 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编:100085 电话:010-88114651 010-56146198 传真:010-88112680 免费电话:8008109828
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