本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 P选择素放免药盒操作说明书 P-selectin (HY-10248) RIA KIT P-选择素(P-selectin,PS)是一种黏附分子,属于选择素家族,分子量约为140kDa,主要存在于内皮细胞和静息的血小板上。可溶性P-选择素存在于血浆或血清中,它是在内皮损伤或血小板活化时由部分表达于细胞表面的P-选择素释放到血液中形成的,在血液中以单体存在,因此测定血浆P - 选择素浓度可评估体内血小板活化及内皮损伤程度。
测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I- P-selectin与抗体的结合量与标准或样品中的P-selectin的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中P-selectin的浓度值。
药盒应用: 心血管病方面的研究
药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 缓冲液(PBS)1瓶。用时每瓶加蒸馏水至50ml.. 2、 PR分离剂(第二抗体) 3、 P-selectin抗体1瓶:用前充分摇匀 4、125I- P-selectin标记 1瓶: 5、P-selectin标准品5瓶,浓度为10、20、40、80、160ng/ml
测定方法:(非平衡法加样) P-selectin RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 100 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放24小时 ———————————————————————————— 125I- sCD14 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项: 本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标: 1. NSB:5% 2. 灵敏度:<1ng/ml。 3. 标准曲线范围:10~160ng/ml。 4. 批内变异系数:CVw<7.0 %。 5. 批间变异系数:CVw < 12.0% 。 6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 25±10.3ng/ml(n=25)。 本次药盒参考数据: —————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 —————————————————————————————— CPM —————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————— 生产日期: 有效日期: 生产批号:
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