本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
热休克蛋白90α放免药盒操作说明书
HSP-90α(HY-10230) RIA KIT
热休克蛋白(heatshockprotein ,HSP)是原核细胞和真核细胞在不良因素作用下所产生的一组特殊蛋白质,广泛存在于生物组织中。根据同源程度及分子量大小,可分为HSP110、HSP90、HSP70、HSP60及小分子HSP家族。HSP90 以是否含有丰富的谷氨酰胺片段而分为HSP90α和HSP90β两类,二者分别由730和724 个氨基酸组成,其同源性为84 % ,分别由不同基因编码,其中HSP90α基因位于14q32.3 ,包含11个外显子和10个内含子。HSP90α是细胞内最活跃的分子伴侣之一,广泛参与细胞的信号转导、激素应答及转录调控过程,对细胞在生理、病理及应激条件下的生存发挥了重要作用。在发生应激反应时,HSP90α可以和那些由于环境刺激而使自身构象发生改变的蛋白相互作用,保证蛋白进行适当的折叠并防止其非特异性聚集,从而维持细胞的正常活性。HSP90α能与多种癌基因和抑癌基因产物结合形成异源蛋白复合体,介导其构象成熟及转运,从而参与细胞转化过程。HSP90还在神经元的迁移以及肿瘤的转移中发挥了一定的作用。
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1、 缓冲液(PBS)1瓶。用时每瓶加蒸馏水至50ml..
2、 PR分离剂(第二抗体)
3、 HSP-90α抗体1瓶:用前充分摇匀
4、125I- HSP-90α 1瓶:
5、HSP-90α标准品5瓶,浓度为10、20、40、80、160pg/ml
测定方法:(非平衡法加样)
HSP-90α RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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125I- HSP-90α 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1. NSB:5%。
2. 灵敏度:<1pg/ml。
3. 标准曲线范围:10~320pg/ml。
4. 批内变异系数:CVw<7.0 %。
5. 批间变异系数:CVw < 12.0% 。
6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
35.6±4.5pg/ml(n=25)。
本次药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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