本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
可溶性CD14放免药盒操作说明书
sCD14(HY-10232) RIA KIT
可溶性sCD14(sCD14)是一种糖蛋白,根据其存在状态分为可溶性(sCD14)和膜结合型(mCD14)。sCD14受体分子量为55kDa,其编码基因位于第五号染色体5q23~5q31区,由两个外显子和一个88bp的短内含子组成。sCD14游离于血清中,mCD14主要表达于成熟的单核巨噬细胞,通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚固于细胞膜上。sCD14作为脂多糖(LPS)的受体,介导LPS的生物学功能,活化的单核/巨噬细胞等sCD14 + 细胞可释放前炎症反应细胞因子、化学因子、生长因子等导致炎症反应,活化的内皮细胞等sCD14 + 细胞可释放白细胞介素(IL)、生长因子、一氧化氮(NO)并表达粘附分子,参与炎症反应导致组织器官损伤。sCD14可非特异性中和、清除LPS从而减轻前炎症反应,sCD14也是革兰阳性菌细胞壁成分肽聚糖、分枝杆菌上的脂阿拉伯甘露糖及多种病原体的受体,它可促进单核细胞与活化的上皮细胞粘附;能与活化的淋巴细胞表面的sCD14配体相互作用,抑制T细胞增殖和B细胞产生抗体。
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1、 缓冲液(PBS)1瓶。用时每瓶加蒸馏水至50ml..
2、 PR分离剂(第二抗体)
3、 sCD14抗体1瓶:用前充分摇匀
4、125I- sCD14 1瓶:
5、sCD14标准品5瓶,浓度为0.5、1、2、4、8ug/ml
测定方法:(非平衡法加样)
sCD14 RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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125I- sCD14 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1. NSB:5%
2. 灵敏度:<0.05ug/ml。
3. 标准曲线范围:0.5~8ug/ml。
4. 批内变异系数:CVw<7.0 %。
5. 批间变异系数:CVw < 12.0% 。
6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
1.5±0.53ug/ml(n=25)。
本次药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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