本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
克拉拉细胞10蛋白放免试剂盒说明书
CC10(HY-10251) RIA KIT
克拉拉细胞10蛋白(clara cell 10-kD protein,CC10)由两个 70 ~ 77 个氨基酸多肽反向平行构成的二聚体形成。其分子量由氨基酸序列决定,在 SDS 聚丙烯酰胺凝胶中具有高迁移率,分子量为 10 ~ 12 kD。CC10 蛋白存在于支气管树非纤毛、非浆液、非黏膜柱状细胞的分泌颗粒中。CC10 是Clara细胞表达分泌的一种内源性抗炎因子, 在炎性气道疾病中有保护作用。
测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I-CC10与抗体的结合量与标准或样品中的CC10的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中CC10的浓度值。
药盒应用:
呼吸系统疾病的研究
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1、 缓冲液(PBS)1瓶。
2、 PR分离剂(第二抗体)
3、 CC10抗体1瓶:用前充分摇匀
4、125I- CC10标记 1瓶:
5、CC10标准品6瓶,浓度为2、4、8、16、32、64ng/ml
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
CC10 RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- CC10 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1. NSB:5%
2. 灵敏度:<0.2ng/ml
3. 标准曲线范围:2~64ng/ml
4. 批内变异系数:CVw<8.0 %。
5. 批间变异系数:CVw < 11.0% 。
6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
11.4±5.1ng/ml(n=25)。
本次药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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