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本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
             克拉拉细胞10蛋白放免试剂盒说明书
                                          CC10HY-10251 RIA  KIT
克拉拉细胞10蛋白(clara cell 10-kD protein,CC10)由两个 70 ~ 77 个氨基酸多肽反向平行构成的二聚体形成。其分子量由氨基酸序列决定,在 SDS 聚丙烯酰胺凝胶中具有高迁移率,分子量为 10 ~ 12 kD。CC10 蛋白存在于支气管树非纤毛、非浆液、非黏膜柱状细胞的分泌颗粒中。CC10 是Clara细胞表达分泌的一种内源性抗炎因子, 在炎性气道疾病中有保护作用。
 
测定原理本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I-CC10与抗体的结合量与标准或样品中的CC10的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中CC10的浓度值。
 
药盒应用:
呼吸系统疾病的研究
 
药盒组成(常温运输,4℃保存)
1、  缓冲液(PBS)1瓶。  
2、  PR分离剂(第二抗体)
3、  CC10抗体1瓶:用前充分摇匀
4、125I- CC10标记  1瓶:
5、CC10标准品6瓶,浓度为2、4、8、16、32、64ng/ml
 
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                           CC10   RIA加液程序        (单位: ul )
             ————————————————————————————
                试   剂            T     NSB        S0     S1~S5     样  品
             ————————————————————————————
               缓 冲 液        ——    100      100      ——       ——
               标 准 品        ——    ——      ——     100         ——
               样    品          ——    ——      ——      ——       100
               抗    体          ——    ——      100     100        100
             125I- CC10     100      100    100     100         100
            ————————————————————————————                   
                                     摇匀4℃ 放24小时
            ————————————————————————————
               分 离 剂          ——     500     500    500       500     
            ————————————————————————————
      混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
     本月标准品每瓶用          ml缓冲液稀释
         本月药盒抗体每瓶用        ml缓冲液稀释    
         本月药盒标记每瓶用        ml缓冲液稀释 
     本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1.  NSB:5%
2.  灵敏度:<0.2ng/ml
3.  标准曲线范围:2~64ng/ml
4.  批内变异系数:CVw<8.0 %。
5.  批间变异系数:CVw < 11.0% 。
6.  正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                     11.4±5.1ng/ml(n=25)。 
本次药盒参考数据:    
           ——————————————————————————————
                  T     NSB     S0     S1    S2   S  S4   S5       
           ——————————————————————————————
            CPM
           ——————————————————————————————
                    N/T%      B0/T%      B/ B0 %
           ——————————————————————————————   
      生产日期:
      有效日期:
      生产批号:
 
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