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本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
            自噬相关蛋白5放免试剂盒说明书
                                   APG5LHY-10253 RIA  KIT
 
自噬相关蛋白5(autophagy related gene5,APG5L),位于人类染色体6q21,有384个核苷酸多态性位点(SNP),共编码276个氨基酸,是参与自噬体形成的重要基因之一。APG5L通过正确连接可形成一种称作自噬体(autophagosome)的细胞器,自我降解,以清除变损或多余衰老的蛋白质和细胞器并实现细胞的内成分的循环再利用。
测定原理本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I-APG5L与抗体的结合量与标准或样品中的APG5L的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中APG5L的浓度值。
药盒应用:
肿瘤疾病的研究
药盒组成(常温运输,4℃保存)
1、  缓冲液(PBS)1瓶。  
2、  PR分离剂(第二抗体)
3、  APG5L抗体1瓶:用前充分摇匀
4、125I- APG5L标记  1瓶:
5、APG5L标准品6瓶,浓度为3.9、7.81、15.625、31.25、62.5、125pg/ml
 
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                           APG5L   RIA加液程序        (单位: ul )
             ————————————————————————————
                试   剂               T     NSB       S0      S1~S5  样  品
             ————————————————————————————
               缓 冲 液           ——    100     100      ——      ——
               标 准 品           ——    ——    ——       100      ——
               样    品              ——    ——    ——       ——      100
               抗    体              ——    ——    100      100       100
             125I- APG5L       100      100     100    100      100
            ————————————————————————————                   
                                            摇匀4℃ 放24小时
            ————————————————————————————
               分 离 剂              ——     500     500    500       500     
            ————————————————————————————
      混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
        本月标准品每瓶用          ml缓冲液稀释
         本月药盒抗体每瓶用        ml缓冲液稀释    
         本月药盒标记每瓶用        ml缓冲液稀释 
     本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1.  NSB:6%
2.  灵敏度:<0.39pg/ml
3.  标准曲线范围:3.9~125pg/ml
4.  批内变异系数:CVw<8.2 %。
5.  批间变异系数:CVw < 10.0% 。
6.  正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                     8.5±4.1pg/ml(n=25)。 
本次药盒参考数据:    
           ——————————————————————————————
                  T     NSB     S0     S1    S2   S  S4   S5       
           ——————————————————————————————
            CPM
           ——————————————————————————————
                    N/T%      B0/T%      B/ B0 %
           ——————————————————————————————   
      生产日期:
      有效日期:
      生产批号:
 
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