本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽 放免试剂盒说明书 GIP(HY-10259) RIA KIT 葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽(glucose-dependent insulinotropic ploypeptide, GIP)是作用最强的肠促胰岛素之一,是由十二指肠和空肠的K细胞合成和分泌,在营养物质刺激下释放进入血液循环并葡萄糖依赖性地促进胰岛素分泌,其结构为含43个氨基酸残基的直链多肽, 分子量为5105u , 其氨基酸排列顺序, 有15处与高糖素相同, 9 处与胰岛素相同, 因而属于胰液素族。GIP的灭活和代谢主要在肾脏, 其次是通过肝脏。GIP主要作用为刺激胰岛素释放, 是肠一胰岛轴中调节胰岛素释放的一个重要因素。
测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I-GIP与抗体的结合量与标准或样品中的GIP的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中GIP的浓度值。
药盒应用: 糖代谢等疾病
药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 缓冲液(PBS)1瓶。 2、 PR分离剂(第二抗体) 3、 GIP抗体1瓶:用前充分摇匀 4、125I- GIP标记 1瓶: 5、GIP标准品6瓶,浓度为31.25、62.5、125、250、500、1000pg/ml
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: GIP RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 100 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- GIP 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1. NSB:8% 2. 灵敏度:<3.125pg/ml 3. 标准曲线范围:31.25~1000pg/ml 4. 批内变异系数:CVw<8.5 %。 5. 批间变异系数:CVw < 6.5% 。 6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 240±103.11pg/ml(n=25)。 本次药盒参考数据: —————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 —————————————————————————————— CPM —————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————— 生产日期: 有效日期: 生产批号:
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