科研药盒,慎用于临床
羟甲基戊二酸单酰CoA还原酶试剂盒说明书
HMG-CoA(HY-60114) KIT
三羟基三甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA,HMG-CoA)是肝脏生物合成胆固醇过程中的主要限速酶, 能够抑制HMG-CoA 还原酶活性的物质具有很好的降血脂活性,因而对该酶活性抑制的体外检测已成为筛选具有降血脂功能活性物质的重要途径。
测定原理:
NADPH在HMG-CoA还原酶的催化下分解成NADP+ , NADPH 的量减少。反应式如下:
HMG-CoA + 2NADPH + 2H+ HMG-CoA 还原酶 MVA + HSCoA + 2NADP+
加入抑制剂后, HMG-CoA 还原酶的活性受到抑制, NADPH 反应的量减少, 因此,反应前后NADPH 量的变化与HMG-CoA 还原酶的活性成正比。
试剂盒组成
试剂1(R1): 反应液(内含NADPH) 1瓶
试剂2(R2): 酶试剂 1瓶
试剂3(R3): 标准品 1瓶 浓度为10(umol/min•mg)
操作步骤
HMG- CoA还原酶操作步骤 单位(ul)
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对照管 标准管 样本
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样本 —— —— 100
水 100 —— ——
标准品 —— 100 ——
试剂1: 100 100 100
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预热 37度 5分钟
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试剂2: 300 300 300
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动态法 340nm波长 标准品定标
计算结果
适用于分光光度计:将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。
(全自动或半自动生化仪直接读取数据)
酶活力[umol/(min•mg)]=[(B—Bo)/(T1一T2)×V]×样品稀释倍数/蛋白浓度(g/L)。
B表示在时间T1和T2之间NADPH下降值(umol)
Bo表示在时间T1和T2之间空白对照背景的变化
V为样品体积数(ml)。
正常参考值:
各实验室应建立自己的正常值
肝组织正常参考值仅供参考:3.298±224 umol/min•mg
注意事项:
1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
2. 本法以定值血清为标准,准确性高。
3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。
4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术指标:
1、线性范围:0-3.5umol/min•mg
2、精密度:批内变异系数:CVw<7.3%;
批间变异系数:CVw < 10%
3、灵敏度:<1 umol/min•mg
生产日期:
有效日期:
生产批号:
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