本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 血红素加氧酶1/热休克蛋白32
放免试剂盒说明书 HO-1/HSP32(HY-10262) RIA KIT 血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)是体内唯一一种催化血红素分解代谢的限速酶,他可以氧化降解血红素,将其分解为一氧化碳、自由铁和胆绿素。HO有3种同工酶,其中HO-1属诱导型,又称为热休克蛋白32(HSP32),分子量为32kDa,主要分布于单核-巨噬细胞系统及网状内皮细胞内,参与血红素代谢, HO-1可被血红素、金属元素、氧化应激、细菌内毒素等因素诱导激活下均可表达并产生CO。HO-1及其代谢广泛参与了抗氧化应激,抗炎症损伤,抗细胞增殖,抗凋亡,抑制血小板聚集,调节血管张力及细胞内信号传递等过程。
测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I-HSP32与抗体的结合量与标准或样品中的HSP32的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中HSP32的浓度值。
药盒应用: 心血管疾病 炎症损伤等疾病
药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 缓冲液(PBS)1瓶。 2、 PR分离剂(第二抗体) 3、 HSP32抗体1瓶:用前充分摇匀 4、125I- HSP32标记 1瓶: 5、HSP32标准品5瓶,浓度为10、20、40、80、160ng/ml
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: HSP32 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 100 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- HSP32 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项: 本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标: 1. NSB:8% 2. 灵敏度:<1ng/ml 3. 标准曲线范围:10~160ng/ml 4. 批内变异系数:CVw<8.7 %。 5. 批间变异系数:CVw < 8.1% 。 6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 30±7.11ng/ml(n=25)。 本次药盒参考数据: —————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 —————————————————————————————— CPM —————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————— 生产日期: 有效日期: 生产批号:
地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 免费电话:8008109828 邮 编: 100085 电 话:(010)88114651 (010) 56146198 传 真:(010)88112680 网址:www.sinoukbio.com E-Mail:sinouk@163.com QQ客服:1749417768
|