本药盒为科研药盒，慎用于临床诊断
              紧密连接蛋白1放免试剂盒说明书
                              CLAUDIN-1（HY-10261） RIA  KIT
       紧密连接蛋白（claudin）属于一个多基因家族,到目前为止,已有24种claudin成员被发现。紧密连接蛋白-1（Claudin-1）是其蛋白家族的一个成员，是一种完整的膜蛋白，分子量为23kDa,有4个疏水的跨膜区,两个细胞外环形结构和位于胞质中的羧基端、氨基端。紧密连接具有将上皮细胞联合成整体的机械作用,加强细胞间的连接,使细胞不易受破坏。炎症介质、细菌、病毒、过敏原及基因突变等原因引起claudin及其结合的蛋白结构改变,使紧密连接破坏,屏障功能受损,组织渗透性提高,导致多种疾病的发生，如过敏性疾病、遗传性疾病及先天性疾病和感染性疾病等。

测定原理：本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理，125I-CLAUDIN-1与抗体的结合量与标准或样品中的CLAUDIN-1的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分(B)与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，通过数据处理可求出样品中CLAUDIN-1的浓度值。

药盒应用：
用于骨代谢的研究

药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 缓冲液（PBS）1瓶。  
2、 PR分离剂（第二抗体）
3、 CLAUDIN-1抗体1瓶：用前充分摇匀
4、125I- CLAUDIN-1标记  1瓶：
5、CLAUDIN-1标准品6瓶，浓度为3.91、7.81、15.625、31.25、62.5、125pg/ml

测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
                          CLAUDIN-1   RIA加液程序        （单位： ul ）
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                试   剂        T     NSB    S0      S1~S6    样  品
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               缓 冲 液       ——    100     100     ——     ——
               标 准 品       ——    ——    ——    100      ——
               样    品       ——    ——    ——    ——     100
               抗    体       ——    ——    100     100      100
            125I- CLAUDIN-1   100     100     100     100      100
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                              摇匀4℃ 放24小时
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               分 离 剂      ——     500     500    500       500     
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      混匀，室温15分钟， 3500 转/分 4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。

结果计算：
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

注意事项：
        本月标准品每瓶用          ml缓冲液稀释
         本月药盒抗体每瓶用        ml缓冲液稀释    
         本月药盒标记每瓶用        ml缓冲液稀释 
     本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

本试剂盒主要技术指标：
1． NSB：10%
2． 灵敏度：<20pg/ml
3． 标准曲线范围：0~6400pg/ml
4． 批内变异系数：CVw<9.3 %。
5． 批间变异系数：CVw < 10.4% 。
6． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                     7.5±3.56pg/ml(n=25)。 
本次药盒参考数据：    
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                  T     NSB     S0     S1    S2   S3    S4   S5      
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            CPM
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                    N/T%      B0/T%      B/ B0 %
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      生产日期：2014-05-18
      有效日期：2014-06-18
      生产批号：20140518