本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
粘膜地址素细胞粘附因子放免试剂盒说明书
MAdCAM-1(HY-10268) RIA KIT
黏膜地址素粘附因子(mucosal addressin cell adhesion molecule-1,MAdCAM-1)简称粘膜地址素-1,为60kDa的单链跨膜糖蛋白。属于免疫球蛋白超家族中的粘附分子,主要表达于肠道粘膜及其相关淋巴组织的血管内皮细胞表面。MAdCAM-1通过与淋巴细胞上相应配体特异性结合,而介导特定淋巴细胞亚群向肠道粘膜的定向迁移,故其在肠道粘膜免疫中具有重要作用。动物实验证实,结肠炎、胰岛素依赖性糖尿病、肝炎、生殖道炎,以及脑脊髓炎等慢性炎症性疾病与MAdCAM-1的异常表达有关。抗MAdCAM-1分子的mAb已用于上述慢性疾病的动物模型的治疗,并取得初步成果。
测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I- MAdCAM-1与抗体的结合量与标准或样品中的MAdCAM-1的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中MAdCAM-1的浓度值。
药盒应用:
炎症、肿瘤等病理学研究
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1、 缓冲液(PBS)1瓶。
2、 PR分离剂(第二抗体)
3、 MAdCAM-1抗体1瓶:用前充分摇匀
4、125I- MAdCAM-1标记 1瓶:
5、MAdCAM-1标准品6瓶,浓度为50、100、200、400、800、1600pg/ml
测定方法:
本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
MAdCAM-1 RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- MAdCAM-1 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1. NSB:10%
2. 灵敏度:<5pg/ml
3. 标准曲线范围:0~1600pg/ml
4. 批内变异系数:CVw<9.3 %。
5. 批间变异系数:CVw < 10.4% 。
6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
197±32.31pg/ml(n=25)。
本次药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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参考文献:
1、抗人粘膜地址素-1单克隆抗体的制备与初步鉴定
生产日期:
有效日期:
生产批号:
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