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                                                                                                      本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
                           肠型脂肪酸结合蛋白放免试剂盒说明书
                                         I-FABP(HY-10269) RIA  KIT

     脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP)是存在于哺乳动物多种组织细胞内的胞浆蛋白,占细胞内可溶性蛋白总量的3%~8%。FABP主要存在于能够摄取和利用脂肪酸的组织中,能结合长链脂肪酸。目前已分离并鉴定出9种类型。I-FABP是其组织类型之一。I-FABP(ileal fatty acid binding protein,I-FABP)是一种相对分子质量为15000小分子蛋白,由131个氨基酸残基组成,特异地表达于小肠黏膜细胞,占肠道蛋白的2%~3%。血清I-FABP是肠缺血的早期而敏感的指标,浓度与肠黏膜损伤程度呈正相关。

测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I- I-FABP与抗体的结合量与标准或样品中的I-FABP的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中I-FABP的浓度值。

药盒应用:
胃肠疾病的研究

药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1、 缓冲液(PBS)1瓶。  
2、 PR分离剂(第二抗体)
3、 I-FABP抗体1瓶:用前充分摇匀
  4、125I- I-FABP标记  1瓶:
  5、I-FABP标准品7瓶,浓度为1.562、3.125、6.25、12.5、25、50、100ng/ml

测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                          I-FABP   RIA加液程序        (单位: ul )
             ————————————————————————————
                试   剂                 T       NSB     S0     S1~S7   样  品
             ————————————————————————————
               缓 冲 液             ——    100     100     ——        ——
               标 准 品             ——     ——    ——     100        ——
               样    品               ——    ——     ——      ——       100
               抗    体               ——    ——     100      100       100
             125I- I-FABP       100     100     100     100        100
            ————————————————————————————                   
                                              摇匀4℃ 放24小时
            ————————————————————————————
               分 离 剂             ——     500     500    500       500     
            ————————————————————————————
      混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。


结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。

注意事项:
         本月标准品每瓶用          ml缓冲液稀释
         本月药盒抗体每瓶用        ml缓冲液稀释    
         本月药盒标记每瓶用        ml缓冲液稀释 
     本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)

本试剂盒主要技术指标:
1. NSB:10%
2. 灵敏度:<0.15ng/ml
3. 标准曲线范围:0~100ng/ml
4. 批内变异系数:CVw<9.4 %。
5. 批间变异系数:CVw < 10.6% 。
6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                    5.65±2.05ng/ml(n=25)。 

本次药盒参考数据:    
           ——————————————————————————————
                  T     NSB     S0    S1    S2   S3    S4   S5   S6  S7     
           ——————————————————————————————
            CPM
           ——————————————————————————————
                    N/T%      B0/T%      B/ B0 %
           ——————————————————————————————   
      生产日期:
      有效日期:
      生产批号:

 

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