本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
肠型脂肪酸结合蛋白放免试剂盒说明书
I-FABP(HY-10269) RIA KIT
脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP)是存在于哺乳动物多种组织细胞内的胞浆蛋白,占细胞内可溶性蛋白总量的3%~8%。FABP主要存在于能够摄取和利用脂肪酸的组织中,能结合长链脂肪酸。目前已分离并鉴定出9种类型。I-FABP是其组织类型之一。I-FABP(ileal fatty acid binding protein,I-FABP)是一种相对分子质量为15000小分子蛋白,由131个氨基酸残基组成,特异地表达于小肠黏膜细胞,占肠道蛋白的2%~3%。血清I-FABP是肠缺血的早期而敏感的指标,浓度与肠黏膜损伤程度呈正相关。
测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I- I-FABP与抗体的结合量与标准或样品中的I-FABP的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中I-FABP的浓度值。
药盒应用:
胃肠疾病的研究
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1、 缓冲液(PBS)1瓶。
2、 PR分离剂(第二抗体)
3、 I-FABP抗体1瓶:用前充分摇匀
4、125I- I-FABP标记 1瓶:
5、I-FABP标准品7瓶,浓度为1.562、3.125、6.25、12.5、25、50、100ng/ml
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
I-FABP RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- I-FABP 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1. NSB:10%
2. 灵敏度:<0.15ng/ml
3. 标准曲线范围:0~100ng/ml
4. 批内变异系数:CVw<9.4 %。
5. 批间变异系数:CVw < 10.6% 。
6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
5.65±2.05ng/ml(n=25)。
本次药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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