科研药盒,慎用于临床 游离肉毒碱测试剂盒操作说明书 Carnitine(HY-50117) 肉毒碱(Carnitine)又叫维生素Bt,是一种类维生素,分子式C7H15NO3,分子量161.20。肉毒碱以游离型和结合型两种形式存在于血液中。肉毒碱在动物肝脏内利用精氨酸和赖氨酸及辅因子维生素C 为原料合成, 是机体脂肪酸进入线粒体内进行β 氧化的载体分子, 对线粒体内CoA 乙酰CoA 的比例起着调节作用, 与心肌梗死、慢性肾功能不全、肝硬化等疾病的关糸十分密切, 因而受到临床的广泛关注。 检测原理:L-肉毒碱与乙酰辅酶A(CoA)在肉毒碱乙酰转移酶催化下,生成乙酰肉毒碱与辅酶A,辅酶A与5,5-双巯基-2-硝基苯酸(DTNB)反应生成5-巯基-2-硝基苯酸(TNB),在410nm下测定吸光度变化,生成量与含量成正比。 L-肉毒碱+乙酰CoA CAT 乙酰肉毒碱+CoA CoA+DTNB → TNB 试剂盒组成: R1:显色剂 1瓶 R2:反应液(内含乙酰CoA)1瓶 R3:反应液(内含肉毒碱乙酰转移酶)1瓶 R4:标准品 1瓶 R5:标本处理液 A、B 2瓶 操作步骤 标本前处理 单位(ul) ———————————————————————————————————— 总肉毒碱 游离肉毒碱 ———————————————————————————————————— 血清 400 400 R5(A) —— 20 ———————————————————————————————————— 孵育45分钟 ———————————————————————————————————— R5(B) 80 80 R5(A) 80 60 ———————————————————————————————————— 离心 3000转/分钟 5分钟 取上清液待测 游离肉毒碱加样步骤 单位(ul) ————————————————————————————————————— 对照管 标准管 样本 —————————————————————————————————————— 上清液 —— —— 50 标准品 —— 50 —— R1: 50 50 50 —————————————————————————————————————— 混匀 37度 孵育 2分钟 —————————————————————————————————————— R2: 25 25 25 —————————————————————————————————————— 混匀 37度 孵育 3分钟 —————————————————————————————————————— R3: 30 30 30 —————————————————————————————————————— 室温混匀 动态法 读取OD值 定标50 计算结果 以各标准管的单位浓度为横坐标,以各管透光度差值为纵坐标作图。(适用于分光光度计) 全自动或半自动生化仪直接读取数据 正常参考值: 各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考:游离肉毒碱48.5±7.5umol/L 总肉毒碱 57±9.5umol/L 注意事项: 1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。 2. 本法以定值血清为标准,准确性高。 3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。 4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。 本试剂盒主要技术指标: 1、线性范围:0-70umol/L 2、精密度:批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 生产日期: 有效日期: 生产批号: 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编:100085 电话:010-88114651 010-56146198 传真:010-88112680 免费电话:8008109828
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