本药盒为科研药盒,慎用于临诊断 肾素活性放免药盒说明书 PRL1(HY-134) RIA KIT 肾素-血管紧张素系统在机体的血压,水和电介质平衡的调节上起着重要作用。因此,“血浆肾素活性”(PRL1)和血管紧张素Ⅱ(AⅡ)浓度的测定已成为原发性和继发性高血压的诊断及研究的重要指标。血浆肾素活性(PRL1)的测定是以血管紧张素I(AⅠ)产生的速率来表示的。AⅡ是直接测定血浆中AⅡ的含量。二者均采用加酶抑制剂来阻断转换酶和血管紧张素酶的活性,以达到准确测定,PRL1和AⅡ的目的。 药盒组成: 1、 AI标准品7瓶,浓度分别为0、0.19、0.38、0.75、1.5、3.0、6.0 ng/ml; 2、 125I-AI 2瓶; 3、 AI抗体1瓶; 4、 缓冲液1瓶; 5、免疫分离剂(第二抗体)1瓶; 6、 8-羟基喹林(0.34M) 1瓶; 7、 二巯基丙醇(0.32M) 1 瓶; 8、 EDTA-Na2(0.32M) 1瓶; 操作方法: 1、酶抑制剂的配制:按取血5ml计,每一只采血管加入,50ul EDTA-Na2(0.32M)(如晶粒析出,可温热溶解)、50ul 8-羟基喹林(0.34M)、25ul 二巯基丙醇(0.32M),混匀,备用或2-8℃贮存可用一周。 2、标本采集:取肘静脉血5ml,迅速注入放在冷水浴冷却的酶抑制剂抗凝管中,摇匀,立刻放回冰水浴中冷却,待离心时取出.以1000转/分,离心5分钟(最好在4℃离心),分离取出血浆,此操作应在15分钟内完 成.血浆备检或-25℃保存,可用2个月。 3、肾素活性的测定:实际上就是测定血浆中的血管紧张素I 的产生的速率来表示: 将冰冻的血浆标本在流动的冷水中融化,快速取双份标本,作对照管的一份标本放在冰水浴中,直接加抗体进行反应,测其浓度、作为测定管的另一份标本放在37℃水浴中温育1小时,取出后放入冰水浴中,加抗体进行反应,测其浓度。测定管浓度减对照管浓度被温育时间除之,则为单位时间内AI的产生速率,称为肾素活性。单位:ng/ml/小时。 加样步骤:加样在冰水浴中进行。 AI RIA KIT ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1-S6 样 品 ———————————————————————————— 温 育 液 —— 200 —— —— —— 标 准 品 —— —— 100 —— —— 样 品 —— —— —— 100 100 125I-AI 100 100 100 100 100 抗 体 —— —— 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀,4℃ 放15小时以上 ———————————————————————————— 分 离 剂 1000 1000 1000 1000 1000 ———————————————————————————— 混匀,4℃放置15分钟, 3500转/分 离心15分钟,吸取上清液,测定沉淀(cpm)。
结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数 座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。 注意事项: 本月标准品用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记用 ml缓冲液稀释 本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)。 技术指标: 1、灵敏度: 0.1ng/ml/h。 2、曲线范围:0.19-6.0ng/ml/h[(nmol/L)=(ng/ml)*0.771]。 3、精密度:批内变异系数cvw< 5%,批间变异系数cvb< 10%。 4、交叉反应:抗AⅠ血清与AⅡ的交叉反应率< 0.01%。 5、正常参考值: AI普通饮食:卧位的测定范围0.07--1.51 ng/ml/h; 立位的测定范围0.33--5.15 ng/ml/h; AI低钠饮食:卧位的测定范围0.92--1.65 ng/ml/h; 立位的测定范围1.75--7.42 ng/ml/h。 肾素活性:2.85 ±0.35ng/ml/h(小时) 本次药盒参考数据: —————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 —————————————————————————————— CPM —————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ——————————————————————————————
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