半胱胺酸蛋白酶蛋白8放免试剂盒说明书
CASPASE-8（HY-10284） RIA KIT
活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-8（Activation of caspase protein -8）是IL-1β转化酶家族成员之一, 有479个氨基酸,分子量为55kD，广泛分布于各种不同类型的细胞中，是Caspase家族中细胞凋亡启动过程中的重要蛋白酶。Caspase-8与诸多疾病及损伤的病理变化有关，所以对其的检测有重要意义。
测定原理：本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理，125I-CASPASE-8与抗体的结合量与标准或样品中的CASPASE-8的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分(B)与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，通过数据处理可求出样品中CASPASE-8的浓度值。
药盒应用：
用于肿瘤细胞凋亡的研究
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 缓冲液（PBS）1瓶。
2、 PR分离剂（第二抗体）
3、 CASPASE-8抗体1瓶：用前充分摇匀
4、125I- CASPASE-8标记 1瓶：
5、CASPASE-8标准品6瓶，浓度为0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4ng/ml
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
CASPASE-8 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- CASPASE-8 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温15分钟，3500 转/分4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1． NSB：8%
2． 灵敏度：<0.02ng/ml
3． 标准曲线范围：0.2~6.4ng/ml
4． 批内变异系数：CVw<8.4 %。
5． 批间变异系数：CVw < 10.5.5% 。
6． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
0.8±0.35ng/ml(n=25)。
本次药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：2014-11-11
有效日期：2014-12-11
生产批号：20141111
地 址：北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A
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