科研药盒,慎用于临床
E-选择素放免试剂盒说明书 E-selectin(HY-10286) RIA KIT E-选择素(E-selectin)是黏附分子选择素家族主要成员之一,为细胞表面糖蛋白,分子量为115kD,由589个氨基酸残基构成,又称内皮细胞白细胞黏附分子,表达于细胞因 子活化的内皮细胞表面。它是体内的一种促炎细胞因子,参与多种白细胞( 包括粒细胞、巨噬细胞、单核细胞等)以CD4+记忆性T细胞亚群的黏附与聚集,它在免疫、炎症及动脉粥样硬化的形成过程中起着重要作用。 测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I-E-Selectin与抗体的结合量与标准或样品中的E-Selectin的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中E-Selectin的浓度值。 药盒应用: 免疫系统疾病的研究 心脑血管疾病的研究 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 缓冲液(PBS)1瓶。 2、 PR分离剂(第二抗体) 3、 E-Selectin抗体1瓶:用前充分摇匀 4、125I- E-Selectin标记 1瓶: 5、E-Selectin标准品6瓶,浓度为10、20、40、80、160、320ng/ml 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: E-Selectin RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 100 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- E-Selectin 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1.NSB:9% 2.灵敏度:<1ng/ml 3.标准曲线范围:10~160ng/ml 4.批内变异系数:CVw<8.4 %。 5.批间变异系数:CVw < 10.5.5% 。 6.正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 23±8.5ng/ml(n=25)。 本次药盒参考数据: —————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 —————————————————————————————— CPM —————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————— 生产日期: 有效日期: 生产批号:
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