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褪黑素受体放免药盒操作说明书
MTR（HY-D0041） RIA KIT
褪黑素受体(melatonin receptor，MR)存在于鸟类及鼠类免疫器官、胸腺、脾及腔上囊，人胚胎的大脑皮质、海马、下丘脑、中脑、嗅球、视交叉等16个脑区，脊髓及视网膜都存在MR，以视交叉及视网膜含量最高，；嗅球含量次之，与嗅觉功能有一定联系；下丘脑及海马含量也较高，与Mel对内分泌调节功能相吻合。MR的结合容量分泌，大鼠脑组织含量最高，兔次之，人类最低。
反应原理：采用竞争机制原理，标准品或样本中的MTR和加入的125I –MTR(标记的MTR抗原）共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –MTR(标记的MTR抗原）与抗体的结合量与标准或样品中的MTR的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后，测定结合部分的结合率作图，即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中MTR的含量。
该药盒主要应用范围：
*II型糖尿病
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． MTR缓冲液（PBS）1瓶
2． PR分离剂（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． MTR标准品5瓶，浓度为0.125、0.325、0.625、1.5、2.5、5、10pg/ml
4． MTR抗体1瓶。
5． 125I - MTR 2瓶（冻干品）。
样品收集：
取静脉血2ml ，注入试管中待凝固后，分离血清，-20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融，混匀后，4℃ 3000rpm/ min 离心5 min，取上清测定。
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
MTR RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T N SB S0 S1~S7 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-MTR 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 5.0 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<6%。
2、 灵敏度：<0.1pg/ml。
3、 标准曲线范围：0.125~10pg/ml。
4、 批内变异系数：CVw<8.0 %；
批间变异系数：CVw <9.5% 。
5、 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
0.589±0.12pg/ml
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：2013-01-30
有效日期：2013-02-30
生产批号：20130130
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