褪黑素受体放免药盒操作说明书 MTR(HY-D0041) RIA KIT 褪黑素受体(melatonin receptor,MR)存在于鸟类及鼠类免疫器官、胸腺、脾及腔上囊,人胚胎的大脑皮质、海马、下丘脑、中脑、嗅球、视交叉等16个脑区,脊髓及视网膜都存在MR,以视交叉及视网膜含量最高,;嗅球含量次之,与嗅觉功能有一定联系;下丘脑及海马含量也较高,与Mel对内分泌调节功能相吻合。MR的结合容量分泌,大鼠脑组织含量最高,兔次之,人类最低。 反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的MTR和加入的125I –MTR(标记的MTR抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –MTR(标记的MTR抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的MTR的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中MTR的含量。 该药盒主要应用范围: *II型糖尿病 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1. MTR缓冲液(PBS)1瓶 2. PR分离剂(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3. MTR标准品5瓶,浓度为0.125、0.325、0.625、1.5、2.5、5、10pg/ml 4. MTR抗体1瓶。 5. 125I - MTR 2瓶(冻干品)。 样品收集: 取静脉血2ml ,注入试管中待凝固后,分离血清,-20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融,混匀后,4℃ 3000rpm/ min 离心5 min,取上清测定。 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: MTR RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T N SB S0 S1~S7 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I-MTR 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 5.0 ml缓冲液稀释 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<6%。 2、 灵敏度:<0.1pg/ml。 3、 标准曲线范围:0.125~10pg/ml。 4、 批内变异系数:CVw<8.0 %; 批间变异系数:CVw <9.5% 。 5、 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 0.589±0.12pg/ml 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期:2013-01-30 有效日期:2013-02-30 生产批号:20130130 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 免费电话:8008109828
|