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             褪黑素受体放免药盒操作说明书
                                MTR(HY-D0041) RIA  KIT
    褪黑素受体(melatonin receptor,MR)存在于鸟类及鼠类免疫器官、胸腺、脾及腔上囊,人胚胎的大脑皮质、海马、下丘脑、中脑、嗅球、视交叉等16个脑区,脊髓及视网膜都存在MR,以视交叉及视网膜含量最高,;嗅球含量次之,与嗅觉功能有一定联系;下丘脑及海马含量也较高,与Mel对内分泌调节功能相吻合。MR的结合容量分泌,大鼠脑组织含量最高,兔次之,人类最低。
反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的MTR和加入的125I –MTR(标记的MTR抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –MTR(标记的MTR抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的MTR的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中MTR的含量。
该药盒主要应用范围
*II型糖尿病
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. MTR缓冲液(PBS)1瓶
2. PR分离剂(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. MTR标准品5瓶,浓度为0.125、0.325、0.625、1.5、2.5、5、10pg/ml
4. MTR抗体1瓶。
5. 125I - MTR  2瓶(冻干品)。
样品收集
    取静脉血2ml ,注入试管中待凝固后,分离血清,-20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融,混匀后,4℃ 3000rpm/ min 离心5 min,取上清测定。
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                       MTR  RIA加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂        T     N SB      S0     S1~S7     样  品
           ————————————————————————————
              缓 冲 液    ——    200    100     ——      ——
              标 准 品    ——    ——    ——    100       ——
              样    品     ——     ——     ——    ——      100
              抗    体     ——    ——    100     100       100
             125I-MTR 100     100     100     100       100
           ————————————————————————————
                             摇匀4℃ 放置24小时
           ————————————————————————————
              分 离 剂    ——   500      500     500       500
           ————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:  
      本月标准品每瓶用   0.5       ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用   10     ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用  5.0     ml缓冲液稀释
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标
1、 NSB:<6%。
2、 灵敏度:<0.1pg/ml。
3、 标准曲线范围:0.125~10pg/ml。
4、 批内变异系数:CVw<8.0 %;
      批间变异系数:CVw <9.5% 。
5、 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                   0.589±0.12pg/ml
本月药盒参考数据
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      T      NSB     S0       S1      S2       S3       S4       S5    
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CPM
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     N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
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生产日期:2013-01-30
有效日期:2013-02-30
生产批号:20130130
  
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