本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 金属蛋白酶组织抑制因子-1放免试剂盒说明书 TIMP-1(HY-H0055) RIA KIT 基质金属蛋白酶抑制剂( tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMPS,)是一组多基因家族的编码蛋白,基质金属蛋白酶的内源性天然抑制因子,可以抑制MMP的活化,促进ECM沉积和抑制其降解。TIMP一1(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1)是TIMPs家族中的典型代表,由巨噬细胞和结缔组织产生,以可溶性小分子量多肽的形式分泌,广泛存在于组织和体液中。TIMP-1是TIMP中活性最强的,适量的TIMP-1能修复损伤的气道,而过多的TIMP-1可以通过对TIMP-1活性的抑制,保护支气管基质蛋白不被降解,从而导致ECM在气道内过度的沉积。TIMP一1又叫促红细胞生长潜能因子,可以促进多种细胞的生长,被认为是血清中的生长因子。其中TIMP-1抑制TIMP-1活性的同时亦有细胞生长因子样作用,可促进新血管生成、成纤维细胞增生及胶原合成,抑制ECM降解并使之沉积,胶原沉积后可导致气道壁增厚及气道狭窄,发生气道重塑。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的TIMP-1和加入的125I –TIMP-1(标记的TIMP-1抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –TIMP-1(标记的TIMP-1抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的TIMP-1的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中TIMP-1的含量。 该药盒主要应用范围: 心血管疾病 呼吸系统疾病 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 TIMP-1 缓冲液1瓶 2、 TIMP-1(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3、 TIMP-1标准品6瓶,浓度为50、100、200、400、800、1600ng/ml 4、 TIMP-1抗体 1瓶。 5、 125I –TIMP-1 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: TIMP-1 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I-TIMP-1 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<6.5%。 2、 灵敏度:<5ng/ml 3、 标准曲线范围:50-1600ng/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.5%; 批间变异系数:CVw <7.1% 。 5、 正常参考值:141.3ng/ml±33.57ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期: 有效日期: 生产批号: 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 免费电话:8008109828
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