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                                                                                                      本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
金属蛋白酶组织抑制因子-1放免试剂盒说明书
           TIMP-1(HY-H0055) RIA  KIT
     基质金属蛋白酶抑制剂( tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMPS,)是一组多基因家族的编码蛋白,基质金属蛋白酶的内源性天然抑制因子,可以抑制MMP的活化,促进ECM沉积和抑制其降解。TIMP一1(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1)是TIMPs家族中的典型代表,由巨噬细胞和结缔组织产生,以可溶性小分子量多肽的形式分泌,广泛存在于组织和体液中。TIMP-1是TIMP中活性最强的,适量的TIMP-1能修复损伤的气道,而过多的TIMP-1可以通过对TIMP-1活性的抑制,保护支气管基质蛋白不被降解,从而导致ECM在气道内过度的沉积。TIMP一1又叫促红细胞生长潜能因子,可以促进多种细胞的生长,被认为是血清中的生长因子。其中TIMP-1抑制TIMP-1活性的同时亦有细胞生长因子样作用,可促进新血管生成、成纤维细胞增生及胶原合成,抑制ECM降解并使之沉积,胶原沉积后可导致气道壁增厚及气道狭窄,发生气道重塑。
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的TIMP-1和加入的125I –TIMP-1(标记的TIMP-1抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –TIMP-1(标记的TIMP-1抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的TIMP-1的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中TIMP-1的含量。
该药盒主要应用范围:
心血管疾病
呼吸系统疾病
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1、 TIMP-1 缓冲液1瓶
2、 TIMP-1(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3、 TIMP-1标准品6瓶,浓度为50、100、200、400、800、1600ng/ml
4、 TIMP-1抗体 1瓶。
5、 125I –TIMP-1 1瓶  
 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                       TIMP-1  RIA加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂      T       NSB      S0     S1~S5      样  品
           ————————————————————————————
              缓 冲 液    ——    200    100     ——      ——
              标 准 品   ——    ——    ——     100       ——
              样    品    ——     ——    ——      ——      100
              抗    体    ——     ——    100      100       100
       125I-TIMP-1  100     100     100      100       100
           ————————————————————————————
                             摇匀4℃ 放置24小时
           ————————————————————————————
              分 离 剂    ——   500      500     500       500
              ————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:  
      本月标准品每瓶用         ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用       ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用       ml缓冲液溶解
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
   本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<6.5%。
2、 灵敏度:<5ng/ml
3、 标准曲线范围:50-1600ng/ml
4、 批内变异系数:CVw<7.5%;
      批间变异系数:CVw <7.1% 。
5、 正常参考值:141.3ng/ml±33.57ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                
本月药盒参考数据:
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        T     NSB    S0     S1    S2    S3     S4     S5  
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  CPM
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      N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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