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科研药盒仅供研究使用
白细胞介素(IL-5)放免药盒操作说明书
IL-5（HY-162） RIA KIT
白细胞介素(IL-5) interleukin-5是白细胞介素介素家族的重要成员之一，在协调和促进以酸性粒细胞为基础的炎性过程起着关键的作用，白细胞介素-5（IL-5）及白细胞介素受体（IL-5R）是哮喘发病的重要物质。IL-5也由抗原活化的cd4+t细胞产生;肥大细胞也能产生IL-5。天然IL-5的分子量为40～50kd，是由二硫键连接的二聚体糖蛋白，但是单体il-5也有il-5活性。IL-5曾补称为t细胞替代因子(tcellreplacingfactor，trf)，后来发现人类的IL-5对b细胞没有明显的刺激作用;其主要功能是刺激嗜酸性粒细胞增殖、分化及活化。IL-5不仅使嗜酸性粒细胞的数量增加，而且能增强其功能。在蠕虫感染和过敏性疾病时出现的嗜酸性粒细胞增多主要是由IL-5引起的。人类IL-5还能促进嗜碱性粒细胞释放组胺和白三烯等炎症介质，从而提高嗜碱性粒细胞的活性。最近发现IL-5具有IgA增强因子（IgA-EF）的活性，增加B细胞的IgA合成，这是对IL-5功能的重要发现，因为这一活性对粘膜免疫的调节起重要作用.
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． IL-5缓冲液（PBS）1瓶
2． PR分离剂（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． IL-5标准品5瓶，浓度为5、10、20、40、80、160ng/l。
4． IL-5抗体1瓶。
5．125I - IL-5 2瓶（冻干品）。
样品收集：
取静脉血2ml ，注入试管中待凝固后，分离血清，-20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融，混匀后，4℃ 3000rpm/ min 离心5 min，取上清测定。
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
IL-5 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-IL-5 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 5.0 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<100pg/ml。
3、 标准曲线范围：5~160ng/l。
4、 批内变异系数：CVw<7.0 %；
批间变异系数：CVw < 10% 。
5、 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
10.5-19ng/L
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：2011-04-12
有效日期：2011-05-11
生产批号：20110412
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