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                                                                                                                  科研药盒,慎用于临床
  胰岛素样生长因子结合蛋白-1放免药盒说明书
                   IGFBP-1(HY-130) RIA  KIT
      胰岛素样生长因子结合蛋白-1(Insulin-like growth factor binding protein-1 IGFBP-1)是IGF-1主要结合蛋白之一, 分子量为25KD.由肝脏、子宫、虹膜、肾脏等细胞合成分泌 ,IGFBP-1是一种促凋亡因子,可竞争性与IGF-1受体结合,调节组织局部IGF-1的浓度而起作用.IGFBP-1还可不依赖IGF-1直接抑制细胞生长.新近研究表明:IGFBP-1与肿瘤的发生发展密切相关,如:乳腺癌.
试剂盒组成与配制
     1、IGFBP-1标准品6瓶,其浓度分别为50、100、200、400、800ng/ml。
     2、125I-IGFBP-1 1  瓶。
     3、IGFBP-1抗体  1 瓶。
     4、缓冲液 一瓶。
     5、分离剂(第二抗体)一瓶。
样本收集和提取
     1、 静脉血3ml,注入含0.5M EDTA-Na230ul的试管中,混匀,离心,取血浆测定。如贮于-20℃2-3月内测定不影响结果。
     2、 组织的提取:取组织称重0.3~0.5g,用新华滤纸吸干组织液和血液,加生理盐水1毫升(含0.05mol/l醋酸20ul),进行研磨,使组织充分粉碎,以3000r/min速度离心10min取上清,沉淀加生理盐水0.5毫升(含0.05mol/l醋酸20ul),以3000r/min速度离心10min取上清,两次上清合并,用0.05mol的NaOH25ul(调PH值7.4左右)
药盒主要应用范围
      *  肿瘤的研究,尤其是血液系统的疾病的研究;
      *  糖尿病,心脑血管疾病(冠状动脉硬化、脑血管疾病、脑血栓)的病理研究;
      *  肝硬化,骨质疏松等方面的研究;;;
测定操作步骤:
                     IGFBP-1   RIA 操作程序     加样单位:ul
  ————————————————————————————————————————                               试  剂      T       NSB      B0     S1-S8    标   本
 —————————————————————————————————————————  

           缓 冲 液    ——      200     ——    ——      ——   
            零 标 准    ——      ——     100    ——      ——
            标 准 液    ——      ——     ——    100      ——
            标    本    ——      ——     ——    ——       100   
            抗    体    ——      ——     100    100       100   
    125I-IGFBP-1  100      100    100     100      100
————————————————————————————————————————
                            混匀,4℃ 放置24小时
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          分 离 剂    500      500    500     500       500
—————————————————————————————————————————        

    混匀,室温放置15分钟,3500转/分离心15分钟。弃上清,测沉淀计数(cpm)。
结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率, 在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。   
注意事项
        1、本月标准品每瓶用       0.8        ml缓冲液稀释
        2、本月药盒抗体每瓶用     5.0        ml缓冲液稀释
        3、本月药盒标记每瓶用     5.5        ml缓冲液稀释
药盒的技术指标
        1、灵敏度:≤ 3Pg/ml。
        2、重复性:批内cv< 8%,批间cv<12%。
        3、回收率:平均回收率 88%。  
        4、正常参考值:100.6±25.6 ng/ml
本月药盒参考数据:
   —————————————————————————————————————
           T     NSB     S0      S1      S2        S3      S4       S5        
    —————————————————————————————————————
    CPM
   —————————————————————————————————————
          N/T%  2.1   B0/T%   35   B/ B0 %    
   —————————————————————————————————————
注:本药盒为Diagnostic System Labortories公司进口分装.
     生产日期:2012-04-10
     有效日期;2012-05-10
     生产批号:20120410
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