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                                                                                                  本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
             核因子KB放免药盒操作说明书
                     NF-kB(HY-H0050) RIA  KIT
   核因子kB(NF—kB)体系主要涉及机体防御反应、组织损伤和应激、细胞分化和调亡以及肿瘤生长抑制过程的信息传递。在多数细胞类型,NF-kB在胞浆与抑制性蛋白质结合形成无活性的复合物。当肿瘤坏死因子等作用于相应受体后,可通过第二信使Cer等激活此系统,而病毒感染、脂多糖、活性氧中间体、佛波酯、双链RNA以及前述信息传递途径中活化的RKC、PkA等则可直接激活NF-kB。激活过程是通过磷酸化抑制性蛋白使其构象改变而从NF-kB脱落,使得NF-kB得以活化。活化的NF-kB进入细胞核,与DNA接触,并启动或抑制有关基因的转录。
该药盒主要应用范围:
   * 肿瘤疾病的研究
   * 炎症疾病研究
   *高血压疾病的研究
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
、 NF-KB缓冲液1瓶
2、NF-KB(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3、 NF-KB标准品7瓶,浓度为0、10、25、50、100、200、400pg/mL
4、 NF-KB抗体 1瓶。
5、 125I –NF-KB 1瓶   
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                       NF-KB  RIA加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂      T       NSB      S0     S1~S6      样  品
           ————————————————————————————
              缓 冲 液   ——    200     100     ——      ——
              标 准 品   ——    ——    ——    100       ——
              样    品    ——    ——    ——      ——      100
              抗    体    ——    ——    100     100       100
      125I- NF-KB   100     100     100     100       100
           ————————————————————————————
                             摇匀4℃ 放置24小时
           ————————————————————————————
              分 离 剂    ——   500      500     500       500
           ————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:  
      本月标准品每瓶用   0.5       ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用   10     ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用  10.5ml   ml缓冲液溶解
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<5%。
2、 灵敏度:<1pg/ml。
3、 标准曲线范围:0-400pg/ml
4、 批内变异系数:CVw<7.1%;
      批间变异系数:CVw < 10% 。
5、 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                 32.26±6.87 pg/mL
 本月药盒参考数据:
 —————————————————————————————————————————
         T     NSB     S0      S1      S2      S3       S4       S5    
 —————————————————————————————————————————
  CPM
 —————————————————————————————————————————
        N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
 —————————————————————————————————————————
      生产日期:
      有效日期:
      生产批号:
  
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