科研药盒,慎用于临床 纤溶酶原激活物抑制因子放免药盒操作说明书 PAI-1(HY-H0051)RIA KIT PAI-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)是一种相对分子质量为50 kD的由379个氨基酸残基构成单链糖蛋白,等电点约4. 5~5. 5,人类PAI-1基因定位于7号染色体q21. 3~q22上,片断大小约12. 3kb,包含9个外显子和8个内含子。PAI-1在体内有三种存在形态,即活性态、潜在活性态和底物态。体内PAI-1大多以潜在活性态形式存在,正常人血浆中活性态PAI-1仅占3%~5%。只有活性态的PAI-1对组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)起抑制作用,从而使活性纤溶酶生成减少,导致纤维蛋白降解减少,给血栓形成创造了有利条件。在人体内, PAI-1的mRNA存在于血管内皮、单核细胞、血小板、脂肪、胎盘、胎儿肝、成纤维细胞、肺等器官、组织和细胞中,在血管内皮、脂肪、肝脏和脾脏中含量最为丰富,而脑及心脏含量较低。PAI-1的主要生理功能为:(1)特异性抑制PA,调节纤溶活性,维持纤溶-凝血系统的平衡; (2)抑制PA对纤维蛋白的水解和细胞外基质作用,影响平滑肌细胞迁移、组织修复、胶原酶激活以及肿瘤生长转移; (3)影响血管损伤后的重塑过程。利用抗原抗体特异性结合的特点,用液相竞争法原理建立了快速、简便的PAI-1放射免疫方法,对血浆浓度进行直接检测。
标本采集:肝素抗凝或者EDTA抗凝取血,4℃离心分离血浆 【药盒组成】(常温运输,4℃保存) 1、 PAI-1缓冲液(液体)1瓶,10ml,用前加蒸馏水稀释到50ml。 2、 PR分离剂(第二抗体)1瓶,60ml。 3、 PAI-1标准品(冻干品)6瓶浓度为0、10、20、40、80、160ng/ml 4、 PAI-1抗体1瓶(冻干品)。 5、 125I – PAI-1 1瓶(冻干品)。 【测定方法】 PAI-1 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- PAI-1 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 充分摇匀4℃温育24小时以上 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,4℃ 3500转/分 离心 15分钟 ,弃上清液,测沉淀cpm。 【计算结果】 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序,直接给 出有关参数,标准曲线及样品浓度。 【注意事项】 本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 主要技术指标: 1、灵敏度:<0.1ng/ml。 2、测定范围:0-160 ng/ml 3、准确性:回收率:91.7% ~101.3% ,平均回收率95.6%。 4、批内变异系数:CVw<4.5 %, 批间变异系数:CVw < 9.5% 。 5、正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 正常值范围9.5-80ng/ml 本月药盒参考数据: ——————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 ————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————— 生产日期:2012-02-20 有效日期:2011-03-20 生产批号:20120220 地 址: 北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮 编: 100085 电 话: (010)88114651 (010)56146198 免费电话: 800810982
|