本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 分化抑制因子1放免试剂盒说明书 Id1(HY-H0054) RIA KIT 分化抑制因子1属于HLH蛋白家族,其4种同源系列Id1、Id2、 Id3、及 Id4均可与碱性HLH蛋白(basic helix-oop-helix,bHLH)作用,阻碍bHLH和DNA结合,影响特异蛋白的表达、抑制细胞的分化,故又称为DNA结合抑制因子(inhibitors of DNA binding-1,ID1)。人Id1蛋白是由155个氨基酸残基组成的单链多肽,基因非常靠近着丝点,定位在20pl,小鼠Id1蛋白是由164个氨基酸残基组成的单链多肽,基因定位在2号染色体上。Id1蛋白作用于多种信号途径而参与人类恶性肿瘤的发生发展,特别是与一些下游效应分子结合而具有潜在癌蛋白属性。 测定原理:采用竞争机制原理,标准品或样品中的Id1和加入的125I –Id1共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 该药盒主要应用范围: 肿瘤性疾病 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 Id1缓冲液1瓶 2、 Id1(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3、 Id1标准品6瓶,浓度为31.25、62.5、125、250、500、1000pg/ml 4、 Id1抗体 1瓶。 5、 125I –Id1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: Id1 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- Id1 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<5%。 2、 灵敏度:<7.8 Pg/ml。 3、 标准曲线范围:31.25-1000pg/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 5、 正常参考值:65pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期:2012-06-01 有效日期:2012-07-01 生产批号:20120601 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 免费电话:8008109828
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