本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 血小板衍性生长因子放免试剂盒说明书 PDGF-B(HY-H0056) RIA KIT 血小板衍性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)家族包括A、B、C、D4种小同的多肽链.通过二硫键形成纯合或杂合二聚体,组成5种亚型:PDGF-AA、PDGF—AB,PDGF—BB,PDGF—CC及PDGF—DD,其中具有生物活性的均为纯合二聚体形式。PDGF—B(platelet derived growth factor-B,PDGF-B)蛋白结构PDGF—B由241个氨基酸残基组成.包含典型的生氏因子结构域.即与血管内皮牛长因子(VEGF)同源的大约100个氨基酸残基的高度保守序列,位于PDGF的N一末端或C一末端,参与PDGF生物特性的调节,该PDGF/VEGF同源结构域在不同物种的进化过程中都是高度保守的。PDGF—B具有短的N一端延长序列,在细胞内水解后PDGF—B被激活,PDGF—B多以同源二聚体形式即PDGF—BB发挥生物学作用,其三维结构由两个亚单位呈反向平行方式排列,每一亚单位由反向平行的B链组成。PDGF-B对成纤维细胞、平滑肌细胞和中性粒细胞有趋化性,该作用在损伤组织的修复过程中极为重 要。多种肿瘤的发生、发展与PDGF—B及其受体的异常表达密切相关。研究发现PDGF—BB通多种机制参与动脉粥样硬化发生发展过程。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的PDGF-B和加入的125I –PDGF-Β(标记的PDGF-B抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –PDGF-Β(标记的PDGF-B抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的PDGF-B的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中PDGF的含量。 该药盒主要应用范围: 急恶性肿瘤疾病 心血管疾病 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 PDGF-Β缓冲液1瓶 2、 PDGF-Β(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3、 PDGF-Β标准品5瓶,浓度为10、30、90、270、810pg/ml 4、 PDGF-Β抗体 1瓶。 5、 125I –PDGF-Β 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: PDGF-Β RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- PDGF-Β 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<6%。 2、 灵敏度:<1 pg/ml。 3、 标准曲线范围:10-810pg/ml 4、 批内变异系数:CVw<6.3%; 批间变异系数:CVw <9.5% 。 5、 正常参考值:28pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期:2012-11-05 有效日期:2012-12-05 生产批号:20121105 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 免费电话:8008109828
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