科研药盒,慎用于临床 信号转导和转录活化因子放免药盒操作说明书 STAT1(HY-H0059) RIA KIT 信号转导和转录活化因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)介导的信号转导有别于传统的信号级联转导系统,无需细胞内蛋白作为信使,直接将细胞外的信号传至细胞核内,从而调节细胞的增殖、分化和凋亡等重要生理活动。信号转导子与转录活化因子1(STAT 1)是连接多种细胞膜受体与选择性效应器之间信号转导的重要蛋白,STAT 1的水平及其活性变化调节着许多生理、生化、免疫反应以及与其相关基因表达,在细胞对细胞因子的应答、细胞活化、细胞分裂及细胞增殖中起重要的作用,而且STAT1是STAT家族中唯一可能对肿瘤细胞的生长起负性调节作用的蛋白. 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 STAT1缓冲液(PBS)1瓶 2、 PR分离剂(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3、 STAT1标准品5瓶,浓度为0.625、1.25、2.5、5、10、20、40ng/ml 4、 STAT1抗体1瓶。 5、 125I - STAT1 2瓶(冻干品)。 样品收集: 取静脉血2ml ,注入试管中待凝固后,分离血清,-20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融,混匀后,4℃ 3000rpm/ min 离心5 min,取上清测定。 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: STAT1 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I-STAT1 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 5.0 ml缓冲液稀释 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<6%。 2、 灵敏度:<0.1ng/ml。 3、 标准曲线范围:0.625~40ng/ml。 4、 批内变异系数:CVw<7.0 %; 批间变异系数:CVw < 10% 。 5、 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 2.5-4.8ngmlL 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期:2013-01-12 有效日期:2013-02-12 生产批号:20130112 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 免费电话:8008109828
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