本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 水通道蛋白1放免试剂盒说明书 AQP-1(HY-H0003) RIA KIT 水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)是人的红细胞膜的一种主要蛋白, 是由四个相同的亚基构成,每个亚基的相对分子质量为28kDa,每个亚基有六个跨膜结构域,在跨膜结构域2与3、5与6之间有一个环状结构,是水通过的通道。AQP1的氨基端和羧基端的氨基酸序列是严格对称的,因此,同源跨膜区(1,4、2,5、3,6)在质膜的脂双层中的方向相反。AQP1对水的通透性受氯化汞的可逆性抑制,对汞的敏感位点是结构域5与6之间的189位的半胱氨酸。AQPl在质膜中以四聚体的形式存在,每个单体都由6个贯穿膜两面的长a螺旋构成基本骨架,其间还有两个嵌入但不贯穿膜的短a螺旋。每个单体蛋白的中空部分都形成具有高度选择性的通道,只允许水分子跨膜运输而不允许带电质子或其他离子通过,在功能上都可以作为一个独立水通道,并且与肾功能有关。 测定原理:采用竞争机制原理,标准品或样品中的AQP1和加入的125I –AQP1共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 该药盒主要应用范围: 肿瘤性疾病 肾功能疾病 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1. AQP1缓冲液1瓶 2. AQP1(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3. AQP1标准品7瓶,浓度为7.8、15.6、31.2、62.5、125、250、500pg/ml 4. AQP1抗体 1瓶。 5. 125I –AQP1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: AQP1 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- AQP1 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<5%。 2、 灵敏度:<0.8 Pg/ml。 3、 标准曲线范围:7.8-500pg/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 5、 正常参考值:42pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期:2012-06-01 有效日期:2012-07-01 生产批号:20120601 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 (010)56146198 免费电话:8008109828
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