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                                                                                                  本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
             水通道蛋白1放免试剂盒说明书
                                 AQP-1(HY-H0003) RIA  KIT
   水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)是人的红细胞膜的一种主要蛋白, 是由四个相同的亚基构成,每个亚基的相对分子质量为28kDa,每个亚基有六个跨膜结构域,在跨膜结构域2与3、5与6之间有一个环状结构,是水通过的通道。AQP1的氨基端和羧基端的氨基酸序列是严格对称的,因此,同源跨膜区(1,4、2,5、3,6)在质膜的脂双层中的方向相反。AQP1对水的通透性受氯化汞的可逆性抑制,对汞的敏感位点是结构域5与6之间的189位的半胱氨酸。AQPl在质膜中以四聚体的形式存在,每个单体都由6个贯穿膜两面的长a螺旋构成基本骨架,其间还有两个嵌入但不贯穿膜的短a螺旋。每个单体蛋白的中空部分都形成具有高度选择性的通道,只允许水分子跨膜运输而不允许带电质子或其他离子通过,在功能上都可以作为一个独立水通道,并且与肾功能有关。
测定原理:采用竞争机制原理,标准品或样品中的AQP1和加入的125I –AQP1共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
该药盒主要应用范围
 肿瘤性疾病
 肾功能疾病
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. AQP1缓冲液1瓶
2. AQP1(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. AQP1标准品7瓶,浓度为7.8、15.6、31.2、62.5、125、250、500pg/ml
4. AQP1抗体 1瓶。
5. 125I –AQP1瓶  
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                       AQP1  RIA加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂      T     NSB      S0     S1~S7      样  品
           ————————————————————————————
              缓 冲 液   ——    200     100     ——      ——
              标 准 品    ——    ——    ——    100       ——
              样    品    ——    ——    ——    ——      100
              抗    体    ——    ——    100     100       100
       125I- AQP1   100     100     100     100       100
           ————————————————————————————
                             摇匀4℃ 放置24小时
           ————————————————————————————
              分 离 剂    ——   500      500     500       500
              ————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:  
      本月标准品每瓶用           ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用         ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用         ml缓冲液溶解
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<5%。
2、 灵敏度:<0.8 Pg/ml。
3、 标准曲线范围:7.8-500pg/ml
4、 批内变异系数:CVw<7.3%;
      批间变异系数:CVw < 10% 。
5、 正常参考值:42pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
本月药盒参考数据:
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        T       NSB       S0      S1    S2     S3     S4     S5     S6       S7
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 CPM
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     N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
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      生产日期:2012-06-01
      有效日期:2012-07-01
      生产批号:20120601
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