本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 水通道蛋白5放免试剂盒说明书 AQP-5(HY-H0004) RIA KIT 水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)的基因位于人染色体12q13,此染色体区域同时含有AQP0和AQP2基因,而鼠类AQP5基因位于15号染色体远端〔1,2〕。AQP5含有265个氨基酸残基,它由795 bp的开放读码框所编码。AQP5的结构基因含四个外显子,它们分别被1.2 kb,0.5 kb和0.9 kb的内含子分隔,分别编码1~121位、122~176位、177~204位和205~265位的氨基酸。AQP5是AQP家族中的一个亚型,它除了分布在肺泡I型上皮细胞,还广泛分布于外分泌腺腺泡细胞膜上,如泪腺、腮腺、汗腺、唾液腺和呼吸道粘膜下腺。AQP5在急性肺损伤的发病中具有重要作用 测定原理:采用竞争机制原理,标准品或样品中的AQP5和加入的125I –AQP5共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 该药盒主要应用范围: 肺功能疾病 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1. AQP5缓冲液1瓶 2. AQP5(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3. AQP5标准品7瓶,浓度为156、312.5、625、1250、2500、5000、10000pg/ml 4. AQP5抗体 1瓶。 5. 125I –AQP5瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: AQP5 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- AQP5 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<5%。 2、 灵敏度:<15.6pg/ml。 3、 标准曲线范围:156-10000pg/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.8%; 批间变异系数:CVw < 9.4% 。 5、 正常参考值:400pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期:2012-06-01 有效日期:2012-07-01 生产批号:20120601 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 (010)56146198 免费电话:8008109828
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