本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
肌凝蛋白重链放免试剂盒说明书
MHC(HY-I0025) RIA KIT
肌凝蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)决定整个肌凝分子的ATP酶活性,还与肌纤维****收缩速度有关。滑行学说用肌小节中粗、细肌丝的相互滑行来说明骨骼肌收缩的机制。粗肌丝主要由肌凝蛋白组成。所有哺乳动物的骨骼肌均包含4个主要的肌凝蛋白重链亚型:慢型MyHC(I-MyHC)和3种快型(IIa-、IIx、IIb-MyHCs)。IIa-、IIx-、IIb-MyHCs最早是在新生儿的骨骼肌中被发现的,他们的表达受到生长发育中许多因素的影响及调节,如:神经支配、激素水平、机械作用力等。在骨骼肌不同发育阶段中有许多不同的但是具有相关生化特性的MyHC同源蛋白表达。在一些具有功能的肌纤维类型中也同样存在多种不同的MyHC同源蛋白表达。I型为慢收缩氧化纤维(Solw twitch oxidative fibers),其氧化酶(主要为琥珀酸脱氢酶ATP酶)活性低,而其主动性收缩力比Ⅱ型纤维低25%-50%左右;Ⅱ型为快收缩纤维,其中IIb型为快收缩糖酵解纤维(Fast twitch glycobtic fiber),SDH活性低,ATP酶活性高,IIA型为快收缩氧化酵解纤维(Fast twitch oxidative glycolytic fibers),其ATP酶和SDH酶活性则介于I型和IIB型之间。II型快收缩纤维具有收缩力大,同时由于ATP酶活性高之特点,其单位张力的能耗约为I型纤维的两倍多,因而,同I型纤维相比,在相同负荷下, Ⅱ型纤维更易疲劳,更易受损。骨骼肌MyHC表达受到生长发育中许多因素的影响, 当肌肉慢性负荷过度增加之后,低ATP酶活性的慢型MyHC增加,而高ATP酶活性的快型MyHC则减少.
测定原理:采用竞争机制原理,标准品或样品中的MHC和加入的125I –MHC共同与一量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
药主要应用范围:运动系统疾病
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. MHC缓冲液1瓶
2. MHC(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. MCH标准品6瓶,浓度为10、20、40、80、160、320 U/ml
4. MHC抗体 1瓶。
5. 125I –MHC 1瓶
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
MHC RIA加液程序 (单位: ul )
————————————————————————————
试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
————————————————————————————
缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- MHC 100 100 100 100 100
————————————————————————————
摇匀4℃ 放置24小时
————————————————————————————
分 离 剂 —— 500 500 500 500
————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<5%。
2、 灵敏度:<1 U/ml
3、 标准曲线范围:10-320 U/ml
4、 批内变异系数:CVw<7.3%;
批间变异系数:CVw < 10% 。
5、 正常参考值:32 U/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
本月药盒参考数据:
———————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
———————————————————————————————————
CPM
—————————————————————————————————————————
N/T% B0/T% B/ B0 %
—————————————————————————————————————————
生产日期:2012-06-01
有效日期:2012-07-01
生产批号:20120601
地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A
北京华英生物技术研究所
免费电话:8008109828
邮 编: 100085
电 话:(010)88114651 (010) 56146198
传 真:(010)88112680
网址:www.sinoukbio.com
E-Mail:sinouk@163.com
QQ客服:1749417768