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本药盒为科研药盒，慎用于临床诊断
高迁移率蛋白1放免试剂盒说明书
HMGB1（HY-I0026） RIA KIT
高迁移率蛋白1（high mobility group box 1protein,HMGB1）由215个氨基酸残基组成，具有3个不同的结构域，即2个同源的L型DNA结合区A box和B box，1个富含天冬氨酸和谷氨酸带负电荷的C端酸性尾（C tail）。A box和B box带有强烈的正电荷，与DNA均有很强的亲和力，为HMGB1的主要功能区。B box是引起炎性反应的功能结构域，而A box具类似全长HMGB1抗体的作用，可以竞争性地抑制HMGB1的致炎功能，C区可以与其他蛋白相互作用来调节HMBG1与DNA的亲和力。高迁移率蛋白1是核内一种典型的非组蛋白，广泛分布于淋巴，脑，肝，肺，心，脾，肾等组织细胞中，HMGB1过表达有抑制细胞凋亡、诱导细胞分化、促进细胞迁移及增殖等作用。它不仅是一种重要的“晚期炎性介质”，也是一种促生长因子和转录因子，与肿瘤的发生、侵袭转移等生物学行为密切相关。
测定原理：采用竞争机制原理，标准品或样品中的HMGB1和加入的125I –HMGB1共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。
标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
该药盒主要应用范围：
肿瘤性疾病
不孕症
非感染性炎症疾病
风湿免疫性疾病
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、HMGB1缓冲液1瓶
2、HMGB1（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3、HMGB1标准品6瓶，浓度为5、10、20、40、80、160 ng/mL
4、HMGB1抗体 1瓶。
5、125I –HMGB1 1瓶
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
HMGB1 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- HMGB1 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<0.5 ng/ml。
3、 标准曲线范围：5-160ng/ml
4、 批内变异系数：CVw<7.3%；
批间变异系数：CVw < 10% 。
5、 正常参考值：8.5ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：2012-05-30
有效日期：2012-06-30
生产批号：20120530
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