本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白放免试剂盒说明书 ECP(HY-I0027) RIA KIT 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophil cationic protein,ECP)是一种单链糖蛋白,呈强碱性(PH>11)是嗜酸性粒细胞活化后脱颗粒释放的一种炎症介质,在过敏性炎症过程中,EOS分泌ECP能够诱导肥大细胞释放组胺,介导上皮损伤和角质细胞损伤。ECP是活化的嗜酸性粒细胞释放的毒性蛋白,在支气管哮喘的发生、发展中起重要作用,可作为评价哮喘疗效的指标。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的ECP和加入的125I –ECP(标记的ECP抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –ECP(标记的ECP抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的ECP的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中ECP的含量。 该药盒主要应用范围: 呼吸系统疾病 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 ECP 缓冲液1瓶 2、 ECP(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3、 ECP标准品6瓶,浓度为2.5、5、10、20、40、80ug/L 4、 ECP抗体 1瓶。 5、 125I –ECP 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: ECP RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I-ECP 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<6.5%。 2、 灵敏度:<0.25ug/L 3、 标准曲线范围:2.5-80ug/L 4、 批内变异系数:CVw<7.1%; 批间变异系数:CVw <8.4% 。 5、 正常参考值:5.8ug/L±1.54ug/L各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期:2012-11-23 有效日期:2012-12-23 生产批号:20121123 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 免费电话:8008109828
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