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                                                                                                     本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
               护骨素放免试剂盒说明书
          Osteoprotegerin(HY-J0004) RIA  KIT
      护骨素(0steoprotegerin,OPG) 又称为破骨细胞形成抑制因子, 是一种分泌型糖蛋白,由380个氨基酸残基组成,以生化特性相似的单体和二聚体两种存在形式。为肿瘤坏死因子受体超家族成员,它是骨代谢的一个重要调节因子。OPG主要在肺、心、肾、骨、脊髓和血管等组织表达水平较高;在骨组织,OPG 主要由成骨细胞产生;在血管系统, 主要由内皮细胞及平滑肌细胞产生,与炎症反应相关。OPG骨骼的OPG主要由OB谱系的各种细胞产生。其生物学作用主要是抑制前体破骨细胞分化、生存、融合与活化,诱导成熟破骨细胞凋亡,是一种重要的破骨细胞负性调节因子。
测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I-OPG与抗体的结合量与标准或样品中的OPG的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中OPG的浓度值。
药盒应用
用于骨代谢的研究
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1、 缓冲液(PBS)1瓶。  
2、 PR分离剂(第二抗体)
3、 OPG抗体1瓶:用前充分摇匀
4、125I- OPG标记  1瓶:
5、OPG标准品7瓶,浓度为2、4、8、16、32、64、128pmol/L
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                          OPG   RIA加液程序        (单位: ul )
             ————————————————————————————
                试   剂          T       NSB      S0     S1~S7    样  品
             ————————————————————————————
               缓 冲 液       ——    100     100     ——      ——
               标 准 品       ——    ——    ——     100       ——
               样    品        ——     ——    ——     ——      100
               抗    体        ——     ——    100     100      100
           125I- OPG      100     100     100     100      100
            ————————————————————————————                                                  摇匀4℃ 放24小时
            ————————————————————————————
               分 离 剂      ——     500     500    500       500     
            ————————————————————————————
      混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项
         本月标准品每瓶用          ml缓冲液稀释
         本月药盒抗体每瓶用        ml缓冲液稀释    
         本月药盒标记每瓶用        ml缓冲液稀释 
         本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标
1. NSB:8%
2. 灵敏度:<0.5ug/L
3. 标准曲线范围:0~128pmol/L
4. 批内变异系数:CVw<8.4 %。
5. 批间变异系数:CVw < 10.5.5% 。
6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                     4.5±1.3pmol/L(n=25)。 
本次药盒参考数据:    
           ——————————————————————————————
                  T     NSB     S0     S1    S2   S3    S4   S5      
           ——————————————————————————————
            CPM
           ——————————————————————————————
                    N/T%      B0/T%      B/ B0 %
           ——————————————————————————————   
      生产日期:2014-04-20
      有效日期:2014-05-20
      生产批号:20140420

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