本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 护骨素放免试剂盒说明书 Osteoprotegerin(HY-J0004) RIA KIT 护骨素(0steoprotegerin,OPG) 又称为破骨细胞形成抑制因子, 是一种分泌型糖蛋白,由380个氨基酸残基组成,以生化特性相似的单体和二聚体两种存在形式。为肿瘤坏死因子受体超家族成员,它是骨代谢的一个重要调节因子。OPG主要在肺、心、肾、骨、脊髓和血管等组织表达水平较高;在骨组织,OPG 主要由成骨细胞产生;在血管系统, 主要由内皮细胞及平滑肌细胞产生,与炎症反应相关。OPG骨骼的OPG主要由OB谱系的各种细胞产生。其生物学作用主要是抑制前体破骨细胞分化、生存、融合与活化,诱导成熟破骨细胞凋亡,是一种重要的破骨细胞负性调节因子。 测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I-OPG与抗体的结合量与标准或样品中的OPG的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中OPG的浓度值。 药盒应用: 用于骨代谢的研究 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 缓冲液(PBS)1瓶。 2、 PR分离剂(第二抗体) 3、 OPG抗体1瓶:用前充分摇匀 4、125I- OPG标记 1瓶: 5、OPG标准品7瓶,浓度为2、4、8、16、32、64、128pmol/L 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: OPG RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 100 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- OPG 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1. NSB:8% 2. 灵敏度:<0.5ug/L 3. 标准曲线范围:0~128pmol/L 4. 批内变异系数:CVw<8.4 %。 5. 批间变异系数:CVw < 10.5.5% 。 6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 4.5±1.3pmol/L(n=25)。 本次药盒参考数据: —————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 —————————————————————————————— CPM —————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————— 生产日期:2014-04-20 有效日期:2014-05-20 生产批号:20140420
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