本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 基质金属蛋白酶9放免试剂盒说明书 MMP-9(HY-K0008) RIA KIT 基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase ;MMPs)家族已分离鉴别出26个成员,编号分别为MMP1~26。根据作用底物以及片断同源性,将MMPs分为6类,为胶原酶、明胶酶、基质降解素、基质溶解素、furin活化的MMP和其他分泌型MMP。Ⅳ型胶原酶为其中重要的一类,它主要有两种形式,一种被糖化,分子量为92kD,命名为MMP-9,另一种非糖化,分子量为72kD,被称为MMP-2。基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase;MMP-9)也称胶原酶或明胶酶B,存在于多种生物体内,不仅可由肺组织结构细胞如成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞和肺泡细胞产生,亦可由中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等炎症细胞产生,主要降解明胶、Ⅳ、V、Ⅶ型胶原及纤维连接蛋白(FN)、纤溶酶原(PG)及弹性蛋白等,能降解完整的基底膜。主要用于肺部及心血管等疾病的研究。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的MMP-9和加入的125I –MMP-9(标记的MMP-9抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –MMP-9(标记的MMP-9抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的MMP-9的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中MMP-9的含量。 该药盒主要应用范围: 心血管疾病 呼吸系统疾病 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 MMP-9 缓冲液1瓶 2、 MMP-9(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3、 MMP-9标准品5瓶,浓度为20、60、180、540、1620ng/ml 4、 MMP-9抗体 1瓶。 5、 125I –MMP-9 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: MMP-9 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I-MMP-9 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<7%。 2、 灵敏度:<2ng/ml 3、 标准曲线范围:20-1620ng/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.1%; 批间变异系数:CVw <8.5% 。 5、 正常参考值:176.3ng/ml±42.12ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ———————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ———————————————————————————————————————— CPM ———————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ———————————————————————————————————————— 生产日期:2012-11-25 有效日期:2012-12-25 生产批号:20121125 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 免费电话:8008109828
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