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科研药盒，慎用于临床
促胰液素放免试剂盒操作说明书
Secretin（HY-10241） RIA KIT
促胰液素（secretin）是第一种被发现的激素。为一种碱性多肽。由27个氨基酸残基组成，含11种不同氨基酸。贝利斯与斯塔林（Bayliss与Starling）等于1902年发现。产生促胰液素的细胞为“S”细胞，主要在十二指肠粘膜，少量分布在空肠、回肠和胃窦。近来已在脑中提纯，因此亦加入脑-肠肽行列。作用为刺激胰腺分泌大量含丰富碳酸氢盐的胰液，对胰酶分泌有弱的加强作用，但如与促胰酶素一起给予，则明显增加促胰酶素分泌。
标本采集：采血前试管内加放抑肽酶30ul/5ml（含150 IU以上）和10%EDTA.Na2 30uL，采血后立即置冰中，30分钟内4℃下2000转/分，离心15分钟取血浆置-20℃待测，可保存3-6个月。
药盒组成：
1、Secretin抗体一瓶。 2、125I- secretin标记一瓶。
3、缓冲液一瓶。 4、分离剂（第二抗体）一瓶。
6、secretin标准品5瓶浓度为：0.5、 1.2、 2.5、 10、 50 pmol/L
测定方法：
Secretin ¬ RIA 操作程序 （单位：ul）
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试 剂 T NSB S0 S1~S10 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- SEC 100 100 100 100 100
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摇匀，4℃ 24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置20分钟，4℃3500转/分 离心15分钟，去上清，测定沉淀cpm值。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果.
注意事项：
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
测定前，血浆标本推荐过C18拄。
附：血浆标本过柱步骤：
1、取0.5ml血浆和0.5ml含1%的TFA(缓冲液A )，在4℃下3500转/分 离心20分钟，取上清。
2、在含60%乙晴溶液中加1%TFA，即为缓冲液B，将缓冲液B 3ml对Sep-Pak C18 柱进行平衡，接着用缓冲液A 3ml 冲洗。
3、将1处理的上清血浆缓慢注入Sep-Pak C18柱中。
4、用缓冲液A 5ml 以1ml/2分钟速度淋洗Sep-Pak C18 柱。
5、再用缓冲液B 3ml淋洗Sep-Pak C18，速度为1ml/3分钟，并收集上述淋洗液。
6、将上述淋洗液全部分别装入10ml西林瓶中，-42℃ 冷冻干燥 ，备用。
7、取干燥后的西林瓶用500 ul 0.05M PH 7.4 PB 进行溶解，并在振荡器上振荡3分钟。实验
时取200ul进行加样。操作步骤见说明书。
Sep-Pak C-18: Waters.inc. Massachusetts.USA TFA:SIGMA .CO .USA 药盒不提供上述二种
试剂（或材料）。
正常参考值：1.0-3.1pmol/L
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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备注：该说明书由英国皇家医学院内分泌部《secretin药盒操作说明书》翻译而来。
（注：本实验操作程序略有改动）
Department of Endocrinology Royal Postgraduate Medical School
生产日期：2012-04-19
有效日期：2012-05-19
生产批号：20120419
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