科研药盒,慎用于临床 α-促黑素细胞刺激素药盒操作说明书 α-MSH (HY-10218)RIA KIT 促黑素细胞刺激素(α-Melanocyte Stimalating Hormoneα-MSH)是一种内源性的神经调节肽,人类垂体细胞及许多垂体外细胞都可产生。通过与其受体结合发挥作用。在生理状态下,αMSH在体内的浓度非常低,变化范围小。当机体产生炎症时,αMSH在血桨中浓度增高,αMSH具有强有力的抗炎免疫调节能力,抑制前炎症细胞因子的生成及活性,使巨噬细胞合成一氧化氮减少,抑制中性粒细胞的趋化性,调整前列腺素的合成,促进抗生细胞因子IL-10的合成。 药盒组成: 1、 125I-αMSH(冻干品) 1 瓶。 2、 αMSH抗体(冻干品) 1 瓶 3、标准品β-EP(冻干品)6瓶,浓度分别为0、0.5、1、2、4、8ng/ml。 4、分离剂(第二抗体)一瓶。 5、缓冲液1瓶。 实验步骤: 1、取组织(米粒大小),立即称重后加到1ml 100℃生理盐水中煮沸5分钟后迅速冷却,再加0.5ml 1N醋酸制成匀浆,置4℃ 1-2小时后离心2000 G 15分钟,取上清,冷冻干燥后用RIA缓冲液复溶,进行RIA测定。或煮沸迅速冷却后用0.1N盐酸制成匀浆,置4℃1-2小时后再用0.1N NaOH中和,离心取上清液-20℃保存待测。 2、测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: α-MSH RIA 加样程序 单位:ul ───────────────────────────── 试 剂 T NSB S0 S1—S5 标 本 ───────────────────────────── 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— MSH 标 准 —— —— —— 100 —— 标 本 —— —— —— —— 200 抗 体 —— —— —— —— 100 125I-α-MSH 100 100 100 100 100 ───────────────────────────── 4℃ 放置24小时 ───────────────────────────── 分 离 剂 500 500 500 500 500 ───────────────────────────── 振荡3分钟,3000转/分 离心 15分钟,弃上清,测沉淀计数cpm。 结果计算: 以N/T、B/T计算NBS、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率, 在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值。或由自动γ计数器预先编制程序,直 接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 正常参考值:0.6~1.2ng/ml 本药盒技术参数: —————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 s8 —————————————————————————————————————— CPM —————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————————————— 生产日期: 有效日期: 地址:北京市海淀区阜成路42号 中裕商务花园2号楼202室 北京华英生物技术研究所 邮编: 100036 电话: (010)88114651 免费电话:8008109
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