科研药盒，慎用于临床
碳酸酐酶放免药盒操作说明书
CA（HY-20128） RIA KIT
碳酸酐酶（carbonic anhydrase，CA ）是一组参与体内酸碱平衡调节及离子交换等过程的含锌金属酶。分布于人体内的肾小管上皮细胞、胃黏膜、胰腺、红细胞、中枢神经细胞和睫状体上皮细胞等组织中。碳酸酐酶是红细胞的主要蛋白质成分之一，在红细胞中的地位仅次于血红蛋白。在血液及其他组织中维持酸碱平衡, 帮助体内组织排除二氧化碳, 确保以CO2 和HCO3-为催化底物的酶保持适度的底物浓度。分布于红细胞的CA 主要参与CO2运输及交换。碳酸酐酶的活性与机体的许多生理功能密切相关。迄今已发现有14 种同工酶。由于碳酸酐酶在体内的重要作用，其功能异常会导致一系列疾病。
反应原理：采用竞争机制原理，标准品或样本中的CA和加入的125I –CA(标记的CA抗原）共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –CA(标记的CA抗原）与抗体的结合量与标准或样品中的CA的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后，测定结合部分的结合率作图，即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中CA的含量。
该药盒主要应用范围：血液疾病
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． CA缓冲液（PBS）1瓶
2． PR分离剂（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． CA标准品5瓶，浓度为15.625、31.25、62.5、125、250、500ug/L
4． CA抗体1瓶。
5． 125I - CA 2瓶（冻干品）。
样品收集：
取静脉血2ml ，注入试管中待凝固后，分离血清，-20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融，混匀后，4℃ 3000rpm/ min 离心5 min，取上清测定。
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
CA RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-CA 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 5.0 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<6%。
2、 灵敏度：<1.5ug/L
3、 标准曲线范围：15.625~500ug/L
4、 批内变异系数：CVw<8.1 %；
批间变异系数：CVw < 9.4% 。
5、 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
9.3±1.53ug/L
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：2013-02-05
有效日期：2013-03-05
生产批号：20130205
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