科研药盒,慎用于临床 三磷酸腺柠檬酸裂解酶放免试剂盒说明书 ATP-Citr ( HY-100233)RIA KIT ATP-柠檬酸裂解酶(ATP citrate lyase)是脂肪酸生物合成中催化重要步骤的一个酶。ATP-柠檬酸裂解酶在许多组织中负责在胞浆中产生乙酰辅酶A的主要酶。该酶是由四个明显相等的亚基组成的四聚物。其产物乙酰辅酶A用以提供多种生物合成途径,其中包括脂肪合成与胆固醇合成。在腺苷三磷酸和辅酶A存在的情况下,会催化柠檬酸裂解,并产生乙酰辅酶A、草酰乙酸、腺苷二磷酸与磷酸盐。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的ATP-CITR和加入的125I –ATP-CITR(标记的ATP-CITR抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –ATP-CITR(标记的ATP-CITR抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的ATP-CITR的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中ATP-CITR的含量。 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 ATP-CITR 缓冲液1瓶 2、 ATP-CITR(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3、 ATP-CITR标准品6瓶,浓度为6.25、12.5、25、50、100pg/ml 4、 ATP-CITR抗体 1瓶。 5、 125I –ATP-CITR 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: ATP-CITR RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I-ATP-CITR 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<6.7 %。 2、 灵敏度:<0.6pg/ml 3、 标准曲线范围:6.25-100pg/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.1%; 批间变异系数:CVw <8.4% 。 5、 正常参考值:22.5pg/ml±3.1pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期:2012-12-23 有效日期:2013-01-23 生产批号:20121223 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 免费电话:8008109828
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