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                                                                                                                    科研药盒,慎用于临床
     三磷酸腺柠檬酸裂解酶放免试剂盒说明书
                          ATP-Citr ( HY-100233)RIA KIT
    ATP-柠檬酸裂解酶(ATP citrate lyase)是脂肪酸生物合成中催化重要步骤的一个酶。ATP-柠檬酸裂解酶在许多组织中负责在胞浆中产生乙酰辅酶A的主要酶。该酶是由四个明显相等的亚基组成的四聚物。其产物乙酰辅酶A用以提供多种生物合成途径,其中包括脂肪合成与胆固醇合成。在腺苷三磷酸和辅酶A存在的情况下,会催化柠檬酸裂解,并产生乙酰辅酶A、草酰乙酸、腺苷二磷酸与磷酸盐。
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的ATP-CITR和加入的125I –ATP-CITR(标记的ATP-CITR抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –ATP-CITR(标记的ATP-CITR抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的ATP-CITR的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中ATP-CITR的含量。
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1、 ATP-CITR 缓冲液1瓶
2、 ATP-CITR(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3、 ATP-CITR标准品6瓶,浓度为6.25、12.5、25、50、100pg/ml
4、 ATP-CITR抗体 1瓶。
5、 125I –ATP-CITR 1瓶  
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                       ATP-CITR  RIA加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂      T     NSB      S0     S1~S6      样  品
           ————————————————————————————
              缓 冲 液    ——    200     100     ——      ——
              标 准 品   ——    ——    ——     100       ——
              样    品    ——    ——     ——     ——      100
              抗    体    ——    ——     100      100       100
   125I-ATP-CITR  100     100     100      100       100
           ————————————————————————————
                             摇匀4℃ 放置24小时
           ————————————————————————————
              分 离 剂    ——   500      500     500       500
              ————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:  
      本月标准品每瓶用         ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用       ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用       ml缓冲液溶解
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标
1、 NSB:<6.7 %。
2、 灵敏度:<0.6pg/ml
3、 标准曲线范围:6.25-100pg/ml
4、 批内变异系数:CVw<7.1%;
      批间变异系数:CVw <8.4% 。
5、 正常参考值:22.5pg/ml±3.1pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
      本月药盒参考数据:
 —————————————————————————————————————————
        T  NSB      S0     S1    S2    S3     S4      S5  
 —————————————————————————————————————————
  CPM
 —————————————————————————————————————————
       N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
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      生产日期:2012-12-23
      有效日期:2013-01-23
      生产批号:20121223
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