淀粉测定试剂盒
HY(50044)KIT
取有代表性的样品至少200g,充分混匀。置于密闭的玻璃容器内。
固液体样品；
取有代表性的样品至少200 g,用组织捣碎机捣碎。置于密闭的玻璃容器内。
试液的制备
用100ml三角杯称取试样0.2-2g（精确至0.0001g），加入二甲基亚碸(AR)20ml和6mol/L盐酸（自配或另配）溶液5ml，于60±1水浴中加热30min（每隔五分钟摇动一次）。冷却至室温后用6mol/L氢氧化钠溶液（自配或另购）和酸度计调整PH值至4.6左右，将溶液转移到250ML容量瓶中，用重蒸馏水定容至刻度（V1），摇匀后用快速滤纸过滤。弃去最初溶液30ML，即为试液。
试液中淀粉含量高于1000ug/ml时，可以适当增加定容体积（V1）。
标准曲线的绘制
按下表操作；
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试管
加入物 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
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淀粉标准液（ml） |
0.00 |
0.20 |
0.40 |
0.60 |
0.80 |
1.00 |
|
试剂1（ml） |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
混匀，38±2C水浴恒温20分钟，冷却至室温
|
试剂2(ml) |
|
3.00 |
3.00 |
3.00 |
3.00 |
3.00 |
|
混匀，36±1C水浴恒温40分钟，冷却至室温 |
|
蒸馏水（ml） |
6.00 |
5.80 |
5.60 |
5.40 |
5.20 |
5.00 |
|
试剂2（ml） |
0 |
40 |
80 |
120 |
160 |
200 |
混匀，用“1”管调仪器零点，于505nm波长处测定各管的吸光度。
以淀粉含量为纵坐标，吸光度为横坐标，绘制标准曲线。
试液测定
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试管（ml）
J加入物 |
B |
测定 |
|
试液V2(ml) |
/ |
0.200～2.00 |
|
试剂1(ml) |
1.00 |
1.00 |
|
混匀，58±2C水浴恒温20分钟，冷却至室温 |
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试剂2(ml) |
3.00 |
3.00 |
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混匀，36±1C水浴恒温40分钟，冷却至室温 |
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试液V2(ml) |
0.200~2.00 |
|
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Z蒸馏水(ml) |
5.8~4.00 |
5.8~4.00 |
混匀，用“B”管调仪器零点，于505nm波长处测定其测定管
1 适用范围
用于食品检测，测定食品中淀粉含量，最低检出限量0.09ug（淀粉）/ml(试液)
2 原理
淀粉在淀粉葡萄糖苷酶（AGS）催化下。最终水解为葡萄糖。葡萄糖氧化酶（GOD）在有氧条件下，催化β-D-葡萄糖（葡萄糖水解溶液）氧化，生成D—葡萄糖酸—δ—内酯和过氧化氢。受过氧化物酶(POD)催化，过氧化氢与4氨基安替比林（4-AAP）和苯酚生成红色醌亚胺。在505nm波长处测醌亚胺的吸光度，比较标准可计算出食品中淀粉的含量。
（C8H10O5）2+nH2O____AGS_____ncoH12o8
C8H12o6+o2-___GOD___C6H10O6+H2O2
H2O2+ C6 H O H+C11H13V3O_POD_ C6H3VO + H2O
3 试剂及组成
试剂组成
R1 10NLX4
R2 60MLX1
60MLX1 (R2:R3―1:1混合后使用)
淀粉标准液200ug∕L
有效成份
AGS > 3000U∕L
GOD > 2000U∕L
POD > 5000U∕L
4AAP 0.00154mmol/L
苯酚 0.022mmol/L
磷酸盐缓冲液 PH7.0
4 仪器
505NM波长分光光度计
5 操作
5.1 应用试剂的制备
试剂1： 即R1试剂
试剂2： 根据需用量R2.R3按1:1混匀，即为试剂2.该试剂4~8摄氏度保存至少稳定二周。
5.2 试样的制备
固体样品
粉末状样品；取有代表性的样品至少200克，充分混匀，置于密闭的玻璃容器内。
颗粒状样品；取有代表性的样品至少200克，用粉碎机粉碎或用研钵研细，通过100目分析筛，置于密闭的玻璃容器内。
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