科研药盒,慎用于临床 琥珀酸脱氢酶试剂盒说明书 SDH(HY-60031)KIT 琥珀酸脱氢酶(Succinatedehydrogenase,简称SDH),黄素酶类,是线粒体内膜的结合酶,属膜结合酶,是连接氧化磷酸化与电子传递的枢纽之一,可为真核细胞线粒体和多种原核细胞需氧和产能的呼吸链提供电子。琥珀酸脱氢酶存在于所有有氧呼吸细胞,和线粒体膜牢固结合,是三羧酸循环中唯一与内膜结合的酶,是脱氢酶中最重要的酶。琥珀酸脱氢酶由α、β两个亚基组成,α亚基相对分子质量为70.0×103,含有FAD和两个铁硫簇;β亚基相对分子质量为27.0×103,含有一个铁硫簇。琥珀酸脱氢酶是反映线粒体功能的标志酶(markerenzyme)之一,其活性一般可作为评价三羧酸循环运行程度的指标,对于评价精子线粒体功能、研究致奶牛酮缺乏症病理过程等具有重要意义。 一、测定原理:以铁氰化钾和琥珀酸钠为底物,使琥珀酸脱氢酶催化反应将铁氰化钾还原为亚铁氰化钾,亚铁氰化钾再与Fe3+作用生成普鲁士蓝,在700nm波长测定吸光值,以检测普鲁士蓝之生成量,作为琥珀酸脱氢酶的还原力,吸光值愈高表示琥珀酸脱氢酶活力愈强。 二、试剂盒组成: 试剂1(R1): 液体 1瓶 试剂2(R2): 液体 1瓶 试剂3(R3): 显色剂 1瓶 标准品: 1瓶 三、操作步骤 琥珀酸脱氢酶操作步骤 单位(ul) ————————————————————————————————————— 对照管 标准管 样本 —————————————————————————————————————— 标准管 —— 25 —— 对照管 25 —— —— 样本 —— —— 25 R1 1000 1000 1000 R2 50 50 50 —————————————————————————————————————— 混 匀 室温 10min —————————————————————————————————————— R3 50 50 50 —————————————————————————————————————— 终点法 波长700nm 蒸馏水调零 标准品定标25,如果得不出结果扩大10倍定标 四、计算结果 适用于分光光度计:将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。 全自动或半自动生化仪直接读取数据,如果定标扩大10倍,最终结果除以10. 五、正常参考值: 各实验室应建立自己的正常值 正常参考值仅供参考:15-25U/ml 六、注意事项: 1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。 2. 本法以定值血清为标准,准确性高。 3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。 4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。 本试剂盒主要技术指标: 1、线性范围:0-160U/ml 2、精密度:批内变异系数:CVw<7.6%; 批间变异系数:CVw < 9.8% 3、灵敏度:<1U/ml 生产日期: 有效日期: 生产批号: 技术参数
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