酶联免疫试剂盒使用说明书 ----氨甲酰磷酸合成酶(CPSI) 使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,只能用于研究用途,不得用于医学诊断。 氨甲酰磷酸合成酶(human carbamyl phosphatesynthetase 1,CPSI)是肝脏细胞能量代谢中尿素循环中的关键酶,主要分布于肝组织中,在体内是以复合物的形式存在的,而尿素循环的代谢途径为肝脏细胞线粒体的一项主要功能,氨甲酰磷酸合成酶可以去除细胞中多余的氨,此酶缺失可以导致高氨血症. 标本收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 药盒组成: 1) 酶标试剂HRP 1 瓶。 2) CPSI抗体1瓶。 3) CPSI标准品6瓶,浓度为25、50、100、200、400、800U/L 4) 终止液 1瓶。 5) 96微孔板1块 6) 显色液1瓶。 7) 稀释液1瓶 8) 洗涤液 9) 说明书 10) 封板膜 11) 密封袋 操作方法: 1) 标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释): 2) 每孔加入抗体100ul包被2小时 3) 弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。 4) 每孔加入封闭液200ul,轻轻晃动混匀,室温静置30分钟 5) 弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。 6) 每孔加入标准品、标本各100ul轻轻晃动混匀,室温静置60分钟 7) 弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。 8) 每孔加入HRP100ul轻轻晃动混匀,室温静置60分钟 9) 弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。 10) 每孔加入显色液100ul,轻轻晃动混匀,显色15分钟 11) 每孔加入终止液100UL终止反应(此时蓝色立转黄色)。 12) 测定:以空白孔调零,在450nm波长下测量各孔的吸光度值(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行 注意事项 1. 从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差 3. 建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数 4. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 5. 为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。 6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 7. 底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。 洗板方法 手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少300ul注入孔内,震荡30秒。根据需要,重复此过程数次。 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中 标本要求 a) 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 b) 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行检测 本试剂盒主要技术参数: 标准范围:0-800U/L 灵敏度: <2.5U/L 正常参考值:200±80U/L 规格: 96T/盒 保存: 2-8℃ 有效期: 6个月(2-8℃)。 地址:北京市海淀区上地信息路2号国际创业园1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编:100085 电话:010-88114651 传真:010-88112680 免费电话:8008109828
|