三羧酸循环中，异柠檬酸脱氢酶的催化异柠檬酸氧化脱羧生成α-酮戊二酸，反应脱下的氢由NAD+接受生成NADH+H+，脱羧使6碳化合物变为5碳化合物。这是三羧酸循环中第一次氧化脱羧生成CO2的反应。此反应不可逆，是三羧酸循环中的限速步骤。异柠檬酸脱氢酶 isocitrate dehydrogenase 有两种类型的酶：要求以NAD为辅酶的酶（EC1．1．1．41）和要NADP的酶（EC1．1．1．42），两者催化同一反应。在三羧酸循环中正常起作用的是要求NAD为辅酶的酶，此酶是为ADP激活的变构酶。
一、反应原理：
在pH 7.5的Tirs-HCI缓冲体系中,ICD催化异柠檬酸脱羧产生a-酮戊二酸 ,同时产生NADPH ,通过监测NADPH产生速率 ,计算出ICD 的活力,在本实验条件下,每升血清每分钟催化产生1umolNADPH 的酶量为一个国际单位。
二、试剂盒组成：
R1：液体 1瓶
R2：液体 1瓶
R1：0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液，含 MnCl₂ 2 mmol/L,NADP 0.2 mmol/L,pH 7.5。
R2：80 mmol/L 异柠檬酸三钠，取异柠檬酸206mg 溶于10ml蒸馏水中。
三、操作步骤：
异柠檬酸脱氢酶操作步骤 单位（ul）
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标准品 样本
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标准品 50 ——
样本 —— 50
试剂一 R1 400 400
试剂二 R2 20 20
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混匀 10分钟 340nm 终点法
四、计算结果：
有半自动和全自动生化仪的直接定标，空白调零，在机器上直接读取结果。
有分光光度计的，将标准品用缓冲液（R1）进行倍比稀释后在分光光度计上读取OD值，将未知标本的OD值在曲线上查出对应的浓度值。
五、正常参考值：
各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：2.22-6.02 U/L
六、注意事项：
1. 样品测定值超过上限，用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。
2. 本法以定值血清为标准，准确性高。
3. 本产品仅用于体外诊断，内含叠氮钠，应避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。
4. 本产品应在2~8℃避光贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
七、本试剂盒主要技术指标：
1、线性范围：0-60 U/ml
2、精密度：批内变异系数：CVw<7.3%；
批间变异系数：CVw < 10%
3、灵敏度：<1 U/ml
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