肌肉纤维NADH-TR组织化学染色方法

测定原理：

     烟酰胺腺嘌呤二核苷酸四唑氧化还原酶（NADH-TR)位于I型、IIA型及IIB型肌纤维内膜的脂质双分子层中。该酶实际上是NADHPH脱氢酶、NAD（P）脱氢酶及NADH脱氢酶等三种酶的合称。通常情况下，NADH氧还原成不溶性的蓝紫色甲月替，在骨骼肌纤维的I型、IIA型及IIB型纤维上沉积下来，使线粒体染成蓝紫色，肌原纤维上的肌动蛋白与肌球蛋白不着色。

NADH-TR组织化学染色法可根据氧化能力不同将肌纤维分为I型和II型肌纤维，I型肌纤维氧化酶含量高于II型。NADH-TR染色后，I型肌纤维呈深蓝紫色，II型肌纤维可依据染色深浅分为IIa型和IIb型，Iia型染色后呈蓝紫色，IIb型呈淡蓝紫色。

染色步骤： 

1、 冰冻切片厚度6-10um，不固定或10%福尔马林固定10分钟后水洗

2、 将室温干燥的切片放入NADH-TR孵育液中，37度孵育30分钟

3、  蒸馏水洗1分钟

4、  90%乙醇2分钟

5、  95%乙醇2分钟

6、  100%乙醇2分钟

7、  100%乙醇和二甲苯（1：1）1分钟

8、  二甲苯2分钟

9、  甘油明封片

小鼠骨骼肌NADH-TR化学染色200X

小鼠骨骼肌NADH-TR化学染色100X

猪肌肉NADH-TR染色   100X

200X

鸡肉组织NADH-TR化学染色